ANÁLISE DA VARIABILIDADE GENÉTICA DE LINHAGENS ISOLADAS DE SOLO E LODO UTILIZANDO MARCADORES RAPD E AVALIAÇÃO DA CAPACIDADE DESTES ISOLADOS EM UTILIZAR HIDROCARBONETOS COMO ÚNICA FONTE DE CARBONO

Fernanda Romanholi Pinhati (UFRJ); Ramon Gomes da Silva (UFRJ); Renata Kelly Leite Passos (UFRJ); Ana Paula Rodrigues Tôrres (CENPES PETROBRAS); Joab Trajano Silva (UFRJ); Vânia Margareth Flosi Paschoalin (UFRJ)

Os hidrocarbonetos policíclicos aromáticos (HPAs) são amplamente estudados devido a sua potencial atividade como agente mutagênico/carcinogênico. Muitos destes compostos são descartados no ambiente junto com os efluentes industriais e, devido a sua baixa solubilidade em água, se acumulam nos sedimentos de ambientes contaminados. O processo de degradação abiótico desses compostos é lento, incompleto, e pode gerar intermediários mais tóxicos do que as moléculas originais. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi isolar bactérias capazes de degradar de forma eficiente esses poluentes. Três isolados de lodo ativado de estações de tratamento de efluentes de refinaria de petróleo e 15 isolados de solo contaminado com petróleo foram analisados quanto a capacidade de degradar HPAs (antraceno, fenantreno, naftaleno), hidrocarbonetos monoaromáticos (benzeno, tolueno, xileno) e hidrocarboneto alifático (hexano). Os microrganismos foram individualmente inoculados em meio mineral contendo o hidrocarboneto como única fonte de carbono e o crescimento foi avaliado pela contagem de UFC em placas. Os microrganismos de lodo degradaram todas as fontes de carbono testadas. A variabilidade genética entre os isolados foi avaliada por meio de marcadores RAPD (Operon Technologies). Inicialmente, foram avaliados os efeitos da concentração de DNA (10, 20 e 30ng), de Mg⁺⁺ (1,5; 2,0 e 3,0 mM) e de Taq DNA polimerase (1U; 2U e 3U) sobre as reações de RAPD. A melhor condição de reação foi obtida utilizando-se 3,0mM de Mg⁺⁺, 2U de Taq polimerase e 30ng de DNA por reação. Os géis obtidos foram analisados pelo programa Gel Compar II v.5.0 (Applied Maths), para construção da matriz de similaridade (usando o coeficiente de Jaccard) e de um dendrograma (usando o método UPGMA). Dois dos microrganismos de lodo apresentaram 95% de similaridade entre si e 45% de similaridade com o terceiro microrganismo obtido a partir desse mesmo ambiente. Quanto aos isolados de solo, os 15 microrganismos foram divididos em 2 grupos que apresentavam 20% de similaridade entre eles. Os resultados permitiram concluir que os isolados são geneticamente diferentes, representando um importante consórcio que poderá ser utilizado na biorremediação de ambientes contaminados. CAPES/FAPERJ/PETROBRAS.