A capacidade de aderir e colonizar materiais inertes através da formação de um biofilme protege a bácteria das defesas do hospedeiro e agente antimicrobiano, tornando o tratamento complexo e podendo resultar em uma infecção crônica que funcionará como foco que pode evoluir para sepse aguda e morte, principalmente em pacientes imunocomprometidos. A importância do biofilme na patogênese das infecções estafilocócicas aumenta, uma vez que maiores concentrações de antibióticos serão necessários para controle da infecção. O mecanismo mais conhecido de produção de biofilme é dependente da produção de uma adesina conhecida como PIA (Polysaccharide Intercellular Adhesin) ou PNAG (Polymeric N-acetyl- glucosamine) codificada pelo operon icaADBC e influenciada por um sistema de regulação variável o qual é afetado por condições ambientais. Assim a detecção dos genes icaA e icaD passou a ser utilizada como marcador molecular do biofilme. A capacidade de formar biofilme é comumente avaliada por testes fenotípicos, mas as condições de crescimento, podem influenciar os resultados. Foram analisadas 46 amostras de Staphylococcus spp obtidos a partir de infecções nosocomiais. Destas, 17 eram resistentes à meticilina e 29 sensíveis, todas portando o gene mecA, sendo classificados como Staphylococcus resistentes à meticilina (MRS) e pré-MRS, respectivamente. As amostras foram analisadas quanto a sua capacidade para formar biofilme in vitro por cultivo em agar vermelho congo. O DNA das amostras foi extraído e quantificado em espectofotômetro para observar a presença dos genes icaA e icaD por PCR e a transcrição destes genes foi avaliada por RT-PCR. Por fim foi estabelecida a relação clonal entre as amostras através da técnica de Eletroforese de Gel em Campo Pulsado (PFGE). Foi observado que a capacidade de formar biofilme nem sempre está associada com a presença ou mesmo a transcrição dos genes icaAD, principalmente em isolados MRS. Portanto, a presença dos genes icaAD não é um marcador molecular eficiente para diferenciar os isolados produtores dos não-produtores de biofilme. A avaliação da relação entre os isolados, por PFGE, revelou grande diversidade entre os pré-MRS e MRS. A maior similaridade, embora ligeira, foi observada entre as amostras sensíveis. A diversidade entre os perfis obtidos sugere múltiplas origens, provavelmente comunitária.