IDENTIFICAÇÃO DE GENES BURKHOLDERIA SP. ASSOCIADOS A ANTAGONISMO A MICRORGANISMOS PATOGÊNICOS

Aline Aparecida Camargo Neves (UMC); Emy Tiyo Mano (USP); Welington Luiz Araújo (UMC)

A busca por novas substâncias com ação antimicrobiana é de extrema importância, tanto para a indústria farmacêutica como para a agroquímica. Além disso, ferramentas de biologia molecular aplicada a estudos de agentes de biocontrole, podem representar um potencial para elucidação dos mecanismos moleculares e poderá auxiliar no desenvolvimento de estratégias de produção destes compostos, bem como auxiliar no desenvolvimento de novas drogas por engenharia bioquímica. Sendo assim, neste trabalho, foram selecionados isolados de Burkholderia sp. capazes de inibir o fungo Fusarium oxysporum. Foram testados 40 isolados de Burkholderia sp., endofíticos e da rizosfera de cana-de-açúcar. Destes 57,5% apresentaram capacidade de inibir o fungo Fusarium oxysporum, e dentre estes, o isolado 115R-B8 foi selecionado para a geração de mutantes por meio da inserção aleatória do transposon Tn5. Foram obtidos 1788 mutantes, destes 433 já foram submetidos ao teste fenotípico, e observado que 12 mutantes o padrão do halo de inibição ao fungo foi modificado, tendo 10 apresentado uma redução significativa do halo de inibição e 2 a perda da capacidade de inibir o fungo. A inserção do Tn5 nestes mutantes foi confirmada por PCR, atualmente a sequência do DNA onde ocorreu a integração do Tn5 está sendo identificada. Tendo em vista que foram observados mutantes com variações no padrão de inibição, pode ser sugerido que diferentes moléculas poderiam estar associadas ao antagonismo de Burkholderia sp. a esse fungo, ou que a mutação em diferentes genes poderiam resultar em níveis diferentes da mesma molécula. Dessa forma, os resultados obtidos permitem inferir que, mais de um gene está envolvido na produção desta(s) molécula(s), devido aos diferentes padrões fenotípicos dos mutantes analisados até o momento, porém ainda não é possível inferir quanto ao modo de funcionamento desses genes, podendo compor uma mesma via ou ainda, interações de vias metabólicas diferentes formando um complexo ativo que desempenha alguma função na produção de antimicrobianos.