CARACTERIZAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS ANTIMICROBIANAS PRODUZIDAS POR BACTÉRIAS ASSOCIADAS A ESPONJAS MARINHAS

Olinda Cabral da Silva Santos (UFRJ); Paula Veronesi Marinho Pontes (UFRJ); Guilherme Ramos da Silva Muricy (UFRJ); Marcia Giambiagi-demarval (UFRJ); Marinella Silva Laport (UFRJ)

As esponjas apresentam uma diversidade notável de metabólitos secundários, muitos deles de grande interesse para a pesquisa biomédica, pois atuam como agentes antibióticos, antitumorais e antivirais. Vários estudos sugerem que as bactérias associadas às esponjas poderiam ser as verdadeiras fontes de alguns destes compostos. Atualmente, sabe-se que os principais compostos bioativos produzidos pelas bactérias pertencem às classes de policetídeos ou peptídeos não-ribossômicos, os quais são sintetizados por enzimas chamadas de sintases de policetídeos (PKSs) e sintetases de peptídeos não-ribossômicos (NRPSs), respectivamente. Um estudo realizado pelo nosso grupo com o objetivo de caracterizar bactérias com atividade antimicrobiana a partir de esponjas, permitiu o isolamento de 149 unidades formadoras de colônias. Dentre estas, nove apresentaram atividade inibitória com amplo espectro de ação contra estirpes de importância médica. Estas estirpes marinhas foram então identificadas através do sequenciamento parcial do gene 16S rRNA como Bacillus pumilus (Pc31, Pc32 e Dr31), Pseudomonas fluorescens (H40 e H41), Pseudomonas putida (H51) e Pseudovibrio sp. (Ca31, Pm31 e Mm37). No presente trabalho, estas estirpes foram submetidas a análise por PCR para detectar a presença dos genes codificadores das enzimas NRPSs e PKSs I e II. As estirpes Pc31 e Pc32 apresentaram o gene para PKSs II e as estirpes H40, H41 e H51 para NRPSs. Os amplicons serão sequenciados e comparados com sequências depositadas em bancos de dados. Adicionalmente, foi realizada uma caracterização química parcial das substâncias antimicrobianas produzidas pelas nove estirpes. Foi observado que as substâncias produzidas pelas estirpes H40, H41, H51, Pc31, Pc32 e Pm31 foram resistentes à ação de todas as enzimas proteolíticas testadas, assim como, resistentes à ação da fosfolipase C e NaOH 2N, sugerindo não terem natureza protéica, fosfolipídica e nem ácida, respectivamente. Foi verificada atividade inibitória nos sobrenadantes de cultura das estirpes Pc31, Pc32 e Pm31. Esta é a primeira etapa para se iniciar estudos de purificação das substâncias antimicrobianas. Estes resultados indicam que as estirpes identificadas podem ser potenciais fontes de produção de substâncias antimicrobianas contra infecções bacterianas de importância médica.