AVALIAÇÃO DA DIVERSIDADE GENÉTICA DE STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE DO SOROTIPO 14, POR ELETROFORESE EM CAMPO PULSADO (PFGE) E TIPAGEM DO GENE PSPA

Camille Moura (UFRJ); Fabíola Kegele (FioCruz); Filomena Rocha (UFRJ); Jaqueline Morais (UFRJ); Lucia Teixeira (UFRJ)

Streptococcus pneumoniae é um patógeno humano causador de doenças invasivas e não-invasivas. Esse microrganismo possui uma cápsula polissacarídica que além de constituir o principal fator de virulência, por sua diversidade antigênica e estrutural, permite a identificação de cerca de 90 sorotipos distintos. A cápsula polissacarídica é o antígeno utilizado nas duas vacinas até hoje licenciadas, as vacinas 23-valente (polissacarídica) e 7-valente (conjugada). Entretanto, vacinas baseadas em componentes protéicos desse microrganismo, principalmente as proteínas associadas à virulência, são alvos de grande interesse em estudos mais recentes. Contudo, para determinar novas estratégias vacinais é necessário delinear as características das amostras prevalentes nas diversas regiões geográficas. O presente estudo teve como objetivo avaliar a diversidade genética entre cepas de S. pneumoniae pertencentes ao sorotipo 14, isoladas no Brasi,l pela caracterização do gene pspA, agrupando-as dentro das famílias 1, 2 e 3 e comparar os resultados com aqueles obtidos pela análise do DNA cromossômico por eletroforese em campo pulsado (PFGE/Pulsed-Field Gel Electrophoresis). A identificação das amostras foi baseada nos resultados dos testes de bile solubilidade e susceptibilidade a optoquina e a tipagem sorológica através de reações de aglutinação em látex e reação de Quellung. Para tipagem genotípica, amostras não susceptíveis a penicilina foram submetidas à técnica de PFGE e posteriormente selecionadas e submetidas à técnica de reação em cadeia da polimerase (Polymerase Chain Reaction/PCR) para determinação das famílias de pspA (pspA/PCR). Foram estudadas 98 amostras isoladas de pacientes e portadores residentes em diferentes localidades do Brasil. As amostras foram agrupadas em 2 complexos clonais (CC): Pen-H (n=76) e Pen-A (n=22) pela técnica de PFGE e ao serem submetidas ao pspA/PCR foram caracterizadas como pertencentes à família 1 (9/98; 9,2%) ou a família 2 (85/98; 86,7%). Quatro amostras (4,1%) pertencentes ao CC Pen-A foram não tipáveis. Não houve diferença significativa entre a distribuição das famílias de pspA entre os CC determinados por PFGE, porém foi observado um predomínio da família 2. Os resultados indicam a predominância dos genes pspA de família 2 entre as amostras incluídas no presente estudo, corroborando observações anteriores sobre amostras de S. pneumoniae isoladas no Brasil.