INTRODUÇÃO
O basidiomiceto Cryptococcus neoformans é um fungo saprófita que pode infectar e causar doença em humanos. O aumento do número de micoses graves e a seleção de linhagens tolerantes torna o desenvolvimento de novas estratégias para o controle de fungos extremamente desejável.
A fotoinativação de fungos é um método promissor, que pode ser utilizado tanto para o controle de micoses, como para a eliminação de fungos do ambiente. O método é baseado no uso de fotossensibilizadores (FS) que se acumulam ou que são preferencialmente metabolizados pelas células do microrganismo-alvo. A seguir, o FS é exposto à luz visível, que, na presença de oxigênio, inicia processos fotoquímicos que produzem uma série de espécies reativas de oxigênio capazes de matar as células fúngicas sem provocar danos no hospedeiro. O objetivo deste trabalho foi avaliar a fotoinativação de células melanizadas de C. neoformans com cloro-alumínio ftalocianina (AlClPc) em nanoemulsão.
MATERIAIS E MÉTODOS
Fungo. Foram utilizadas células melanizadas da linhagem Cryptococcus neoformans var. neoformans ATCC 28957.
Fotossensibilização. Em microtubos de 1,5 mL, foram colocados 50 mL da suspensão de células (106 células mL-1) e 450 mL de AlClPc (concentrações finais de 0; 2,6; 0,26 e 0,026 mg mL-1). As células foram lavadas uma vez, ressuspensas em PBS e 400 mL foram colocados em placas de cultura. As suspensões foram expostas ao laser (5 e 10 J cm-2, 675 nm). Microtubos-controle, que foram protegidos da luz durante as exposições, foram preparados em paralelo para todos os tratamentos. Após as exposições, 50 mL foram plaqueados para a determinação das UFCs. O efeito das diferentes concentrações do FS foi estimado através da determinação da fração de sobreviventes.
DISCUSSÃO DOS RESULTADOS
Exposições apenas à luz ou apenas ao FS não reduziram, de maneira significativa, a sobrevivência das células. A fotoinativação foi diretamente proporcional à concentração de AlClPc e à dose de luz. A eliminação do fungo foi completa pelas combinações mais apropriadas de luz e concentrações do FS (10 J cm-2 e 0,26 e 2,6 mg mL-1).
CONCLUSÃO
A completa fotoinativação do fungo pela ftalocianina, em condições compatíveis com a terapia fotodinâmica, torna possível a utilização da AlClPc em nanoemulsão para o tratamento de micoses causadas por C. neoformans.
Agradecimentos a CAPES e a FAPESP