Resumo

Introdução: A tuberculose (TB) é um importante problema de saúde pública, portanto, é necessário o desenvolvimento de novas ferramentas para diagnóstico rápido e confiável de Mycobacterium tuberculosis (MT) s, que permitam o tratamento adequado além da prevenção da transmissão da TB. Objetivo: O objetivo deste estudo foi comparar dois testes moleculares para diagnóstico de bactérias do Complexo MT a partir de amostras clínicas, e comparar os resultados obtidos com cultura e critérios clínicos utilizados para definição da doença. Materiais e métodos: Foi realizado um estudo transversal, no qual foram selecionadas 124 amostras pulmonares. As amostras foram testadas paralelamente com a cultura para dois PCR “in house”, NESTED-PCR e Real Time PCR (RT-PCR), para amplificação da sequência IS6110, comum a todas micobactérias do complexo. Os resultados foram comparados com dois “padrão-ouro”: cultura para MT e cultura + critérios clínicos. Para avaliação dos dados clínicos observou-se os seguintes critérios: infecção pelo HIV, presença e tipo de lesão pulmonar, tratamento prévio e aplicação de teste terapêutico. Foi utilizada uma amostra comercial com quantificação conhecida para determinação do Limite de Detecção Analítico (LDA). Discussão dos resultados: Os resultados demonstraram uma alta sensibilidade e especificidade de ambos os testes moleculares. RT-PCR 98% e 91 %, Nested-PCR 86% e 93% respectivamente, quando comparados à cultura.. O LDA foi de 1 cp/µL para o RT-PCR e de 25 cp/µL para o Nested-PCR . Quando comparamos os resultados frente aos critérios clínicos a sensibilidade e especificidade obtidas foram de 90% e 97% RT-PCR e 80% e 99% para o Nested-PCR. Houve um pequeno decréscimo de sensibilidade de ambos os métodos moleculares quando comparados com cultura + critérios clínicos em relação à cultura, entretanto a especificidade foi bastante elevada. Comparando os testes moleculares, o RT-PCR tendeu apresentar uma sensibilidade maior que o NESTED-PCR (98% vs 86%)para o diagnóstico de tuberculose, tanto quanto comparado a cultura (>10%), quanto quando comparado a cultura + critério clínico(90% vs 80%) (~10%). Conclusões: Os resultados indicam que utilizado em conjunto testes moleculares com dados clínicos pode-se obter elevada sensibilidade e especificidade para o diagnóstico rápido e eficaz da TB. Estes testes possuem grande potencial para uso em diagnóstico. Apesar de não estatisticamente significativos o RT-PCR apresentou maior sensibilidade e elevada especificidade, além disso, o baixo risco de contaminação e a rapidez do protocolo facilitam o uso deste teste.