Resumo

Los microorganismos patógenos desarrollan diversas estrategias para colonizar e invadir a su hospedero. Actualmente se dispone de nuevas tecnologías que permiten profundizar en el estudio de estos procesos, generando conocimiento que contribuye a la implementación métodos de control más eficientes. Este trabajo está enfocado al estudio de la bacteria fitopatógena Ralstonia solanacearum (Rs) agente causal de la marchitez bacteriana de la papa. Rs es capaz de desarrollar infecciones latentes que no producen síntomas de marchitamiento en la planta y significan un riesgo importante de diseminación de la enfermedad. Este hecho dificulta el desarrollo de variedades de papa con resistencia verdadera a Rs ya que enmascara la presencia del patógeno en el germoplasma seleccionado en base al desarrollo de síntomas. La especie silvestre uruguaya más valiosa para el mejoramiento genético del cultivo de papa es Solanum commersonii (Sc). En el presente trabajo se presenta la aplicación de herramientas moleculares y biotecnológicas con el objetivo de fortalecer los criterios de selección de germoplasma resistente a Rs. Por un lado se desarrolló un método de detección de Rs mediante PCR en tiempo real capaz de detectar y cuantificar la presencia del patógeno en los tejidos vegetales con gran especificidad y sensibilidad. Este método se aplicó a la detección de infección latente por Rs en el germoplasma seleccionado como resistente en el programa de mejoramiento de papa. Por otro lado, se desarrolló un método de screening de germoplasma basado en el uso de cepas reporteras Rs con propiedades de fluorescencia y luminiscencia. La transferencia de los genes gfp y lux se realizó por transformación natural, seleccionando 12 clones para su posterior evaluación. Se logró detectar señales de fluorescencia y luminiscencia en todos los clones evaluados, seleccionándose los clones con mayor intensidad para la realización de ensayos de inoculación sobre genotipos de Sc. Las cepas reporteras generadas se utilizarán para el seguimiento del proceso de colonización e infección en plantas de Sc con diferentes grados de resistencia a Rs. De esta forma se pretende contribuir al mejor aprovechamiento del germoplasma existente, así como a profundizar en el estudio de las complejas interacciones que se establecen en este patosistema.