Resumo

Introdução: A identificação de Staphylococcus aureus é importante para determinar a conduta clínica que será adotada no paciente com bacteremia, assim como a detecção precoce da resistência à oxacilina em instituições hospitalares com baixa incidência de resistência a esse antimicrobiano permite racionalizar o uso de glicopeptídios. O principal mecanismo de resistência em S. aureus é a produção de PBP2a, uma transpeptidase com baixa afinidade pela oxacilina. Neste trabalho foi avaliada a performance do uso da coagulase diretamente de frascos de hemoculturas positivas, associado à pesquisa de PBP2a com anticorpos monoclonais impregnados em partículas de látex. Materiais e métodos: Foram selecionadas, do banco de microrganismos do Fleury Medicina Diagnostica, 15 S. aureus resistentes à oxacilina (MRSA), 15 S. aureus sensíveis à oxacilina (MSSA) e 10 Staphylococcus coagulase negativos. As cepas S. aureus ATCC 43300 (controle positivo) e S. aureus ATCC 29213 (controle negativo) foram utilizadas como controle de qualidade. As cepas foram semeadas em ágar sangue e após 24 horas de incubação, foram preparadas suspensões em solução salina 0,9% com turbidez equivalente ao padrão 0,5 da escala de MacFarland. Dessas suspensões foi inoculado 1 ml com seringa descartável, em frascos de hemoculturas previamente liberadas como negativas. As hemoculturas foram incubadas no sistema Bactec® 9240 até haver indicação de positividade no sistema. Após o sinal de cultura positiva emitida, foi realizado o teste da coagulase em tubo (TCT) com 5 gotas da amostra pura e diluída com solução salina 1:10 em 1mL de plasma de coelho. Os resultados foram analisados após 2, 3 e 4 horas de incubação a 35ºC±1ºC em ar ambiente. Paralelamente, 10µL de amostra foram semeados diretamente do frasco de hemocultura positiva em Ágar sangue e incubados sob as mesmas condições supracitadas, para a realização do teste de detecção de PBP2a, utilizando-se o kit bioMerieux® Slidex MRSA Detection. A susceptibilidade à oxacilina foi confirmada utilizando-se o método da disco-difusão com oxacilina e cefoxitina. Resultados e discussão: A maior sensibilidade do teste da coagulase em tubo - 94,4% - foi obtida após quatro horas de incubação. Quanto ao kit para detecção de PBP2a a sensibilidade e especificidade foram de 100%. Conclusão: A pesquisa simultânea de PBP2a e TCT em frascos de hemocultura positivos podem ser implementados na rotina microbiológica, pois permitem a detecção precoce e específica de MRSA.