Resumo

Phialophora verrucosa é um dos agentes etiológicos da cromoblastomicose, uma infecção granulomatosa de difícil tratamento que acomete a pele e tecido celular subcutâneo. Nosso grupo demonstrou a presença de metalopeptidase secretada em conídios de P. verrucosa e que inibidores de metalopeptidases/agentes quelantes foram capazes de inibir o crescimento e a morfogênese deste fungo patogênico. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito desses inibidores na ultraestrutura fúngica, bem como na citotoxicidade em células animais. Para os experimentos, 5 x 106 conídios foram pré-tratados durante 15 h com 5 µg/ml de 1,10-Fenantrolina (Fen), e seus derivados denominados aqui como Fen-Cu2+, Fen-Ag2+ e Fendio. Os conídios foram fixados e o material processado como de rotina para microscopia eletrônica de transmissão (MET). Para o teste de citotoxicidade, macrófagos RAW-264.7 foram tratados com 0,15 a 5,0 µg/ml de Fen ou Fen-Ag2+ e incubados durante 24 h a 37°C. A viabilidade foi ensaiada com MTT a 5 mg/ml. Como resultados da MET, observamos que conídios tratados com os inibidores apresentaram importantes alterações morfológicas indicativas de morte celular. A célula tratada com Fen apresentou desprendimento de parede celular e intensa vacuolização. Após tratamento com Fendio foi observado um aumento no número de mitocôndrias. Enquanto que, Fen-Cu2+ e Fen-Ag2+ causaram acúmulo de corpos lipídicos nas células fúngicas. Nossos dados demonstraram ainda que a Fen apresenta baixa toxicidade, uma vez que, nas concentrações testadas não foi capaz de alterar a viabilidade (≥90%) do macrófago. Enquanto que, a Fen-Ag2+ demonstrou maior toxicidade, permanecendo o macrófago 90% viável somente na concentração igual ou inferior a 0,15 µg/ml. Nossos resultados em conjunto corroboram que agentes quelantes complexados ou não a metais apresentam um grande potencial terapêutico contra infecções microbianas. Apoio Financeiro: CNPq, FAPERJ e CAPES, Fiocruz.