Resumo

Uma das principais fontes de contaminação do solo são os derrames acidentais durante o transporte e armazenamento de combustíveis líquidos. Desde 2008, o diesel brasileiro recebe a adição do biodiesel e ainda poucos estudos referem-se ao impacto dessa mistura no solo e às possibilidades de descontaminação. A biorremediação é utilizada para acelerar a descontaminação de uma área e a bioaumentação consiste em introduzir no local impactado micro-organismos com potencial enzimático para degradar o contaminante. Este trabalho propôs isolar fungos de solo contaminado com a mistura B10 (10% de biodiesel e 90% de diesel) e comparar o potencial degradador desses micro-organismos com fungos isolados de tanques de combustível. O isolamento foi realizado através de pressão seletiva com base em transferências periódicas realizadas a cada sete dias, durante três semanas, para meio mineral mínimo Bushnell Hass (BH) contendo 1% de B10. Após os 21 dias, 100µL das amostras foram cultivadas em meio Sabouraud com cloranfenicol (100mg.L-1), pH 5 e 1% de B10 a fim de isolar apenas fungos. Os dez fungos filamentosos isolados a partir do solo contaminado e outros quinze previamente isolados de tanques de armazenamento foram submetidos à análise do potencial de degradação do combustível B10. O ensaio foi realizado em frascos de vidro nos quais foram adicionados 10mL de meio mineral mínimo com o indicador redox 2,6-diclorofenolindofenol (DCPIP), o inóculo fúngico (105 esporos mL-1) e três diferentes concentrações de B10, 1, 5 e 20%. Diariamente foram feitas avaliações quanto a alterações na coloração do meio e após 14 dias, foi feita a avaliação do peso seco de cada isolado. Após 96h de incubação, três fungos isolados de tanque e dois isolados do solo apresentaram alteração total na coloração do indicador. O indicador funciona como aceptor artificial de elétrons e altera a coloração do meio quando reduzido, acusando a oxidação do combustível pelos fungos. Os mesmos isolados foram os que apresentaram maior formação de biomassa, todos na concentração de 20%, com diferença em relação ao peso seco nas demais concentrações (p<0,05). Os fungos selecionados por essa metodologia serão submetidos a posteriores ensaios para analisar a degradação do B10 em solo contaminado.