XXI ALAM
Resumo:666-1


Poster (Painel)
666-1ANÁLISIS GENÓMICO Y CARACTERIZACIÓN DE GENES ASOCIADOS A FIMBRIAS EN Helicobacter pylori
Autores:Nancy Karina Arteaga Resendiz (IPN - INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL / HIMFG - HOSPITAL INFANTIL DE MÉXICO FEDERICO GÓMEZ) ; Norma Velázquez Guadarrama (HIMFG - HOSPITAL INFANTIL DE MÉXICO FEDERICO GÓMEZ) ; Jorge Girón (UF - UNIVERSIDAD DE FLORIDA) ; Sandra Rivera Gutiérrez (IPN - INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL) ; Alfonso Méndez Tenorio (IPN - INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL) ; José de Jesús Olivares Trejo (UACM - UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE LA CIUDAD DE MÉXICO) ; Alejandra Rodríguez (HIMFG - HOSPITAL INFANTIL DE MÉXICO FEDERICO GÓMEZ) ; Francisco Javier Torres López (IMSS-CMNSXXI - CENTRO MÉDICO NACIONAL SIGLO XXI)

Resumo

La infección por H. pylori representa un grave problema de salud pública, inicia con la adhesión de la bacteria al epitelio gástrico mediada por diversas adhesinas. Estudios realizados por nuestro grupo de trabajo mediante microscopía electrónica de transmisión (MET), se han observado estructuras semejantes a fimbrias, que podrían estar involucradas en la adhesión de la bacteria al epitelio gástrico y/o en la formación de biopelícula; por lo que, el objetivo del trabajo es realizar el análisis genómico y la caracterización de genes asociados a la biogénesis de fimbrias en H. pylori. Se utilizó la base de datos del NCBI y la herramienta de PSI BLAST para la búsqueda de secuencias de proteínas relacionadas con la biogénesis de fimbrias. Los alineamientos múltiples se realizaron con el programa T-COFFEE y HMMer. La predicción de estructuras secundarias se realizó con ANTHEPROT y la estructura terciaria de las proteínas se predijo con el programa ITASSER. La caracterización de los genes se realizo mediante RT-PCR punto final durante la formación de la biopelícula (0, 1, 3, 6, 24 y 48 h de incubación de la cepa H. pylori 26696 en cultivo líquido) y se observó la formación de estructuras semejantes a fimbrias mediante MET empleando tinción negativa con ácido fosfotúngstico (PTA). Dos proteínas hipotéticas (A y N) fueron homólogas a PilN y PilA presentes en Campylobacter rectus, Xylella fastidiosa y Pseudomonas aeruginosa, ambas ensamblan fimbria tipo IV. Se observó un aumento en la expresión de la proteína hipotética A en 1 hr y disminuye con respecto al tiempo. Asimismo, mediante la MET se observó la formación de estructuras finas semejantes a fimbrias. Diversos autores han demostrado que las fimbrias juegan un papel importante en la adherencia y formación de la biopelícula a superficies inertes, razón por la cual, nuestra proteína podría estar directamente relacionada con dicho evento. Por su parte, las proteínas que conforman la familia de pilinas tienen secuencias muy variables y solo presentan un área conservada, lo que habla de la gran variabilidad en sus estructuras. Nuestros alineamientos presentan la misma área conservada que se observa en otras proteínas PilA, descritas para otras bacterias por otros autores.


Palavras-chave:  ANÁLISIS GENÓMICO, BIOPELÍCULA, FIMBRIAS, PILINA