Resumo

Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii são fungos cosmopolitas encontrados em diferentes ambientes, sendo conhecidos por causar doenças devido à inalação dessas células fúngicas. Esses patógenos são agentes etiológicos da criptococose, uma doença com origem pulmonar e tendência à migração para o Sistema Nervoso Central (SNC) e cujas manifestações clínicas mais comuns são a doença pulmonar e a meningite, sendo que C. neoformans acomete principalmente indivíduos imunossuprimidos, enquanto C. gattii acomete principalmente indivíduos imunocompetentes. Esses agentes são produtores de urease, uma metaloenzima que converte a uréia em dióxido de carbono e amônia, sendo essa característica um dos fatores de virulência dessas espécies fúngicas devido ao fato das mesmas utilizarem a amônia como fonte de nitrogênio. O objetivo deste trabalho foi comparar a atividade de urease em ambas as espécies de Cryptococcus. Duas amostras de referência e 10 isolados clínicos ou ambientais de cada espécie foram analisados no experimento, obtendo-se um total de 24 amostras submetidas ao ensaio. As amostras foram cultivadas em Agar Sabouraud a 37º C por 48 horas. O inóculo foi preparado em tampão fosfato-salino (PBS) e o número de células foi estimado por transmitância de 77% a 530 nm e diluídas 10 vezes em caldo Uréia de Christensen (para se detectar a atividade da urease por espectrofotometria), obtendo-se uma concentração de cerca de 1x10⁵ células/mL. As amostras foram incubadas a 37º C e foram feitas leituras em leitor de microplacas por absorbância a 550 nm nos tempos de 2, 24 e 48 horas. Verificou-se que no tempo de 2 horas não houve variação significativa na absorbância das amostras das duas espécies. Após 24 horas foi possível notar uma maior atividade de urease em Cryptococcus gattii, resultado também observado após 48 horas, mas com uma diferença mais acentuada da ação da enzima. Os resultados obtidos neste ensaio mostram que Cryptococcus gattii foi maior produtor de urease do que C. neoformans.