Resumo

O termo microalgae ou microalgas representa um grupo de micro-organismos fotossintetizantes, amplamente diversos em relação à função e taxonomia, consistindo de procariotos (cianobactérias) como eucariotos. A importância das microalgas como produtores primários na fixação de CO₂ e produção de O₂ é indiscutível, bem como, das diversas aplicações biotecnológicas. Estudos sobre suas relações filogenéticas e diversidade genética com base na análise de sequenciamento de genes do 16S e 18S ribossomal (rRNA) e outros genes marcadores são fundamentais. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi caracterizar e identificar estirpes de microalgas pela análise do sequenciamento parcial do 18S rRNA. Foram utilizadas sete estirpes de microalgas, isoladas de lagoas de fotossintéticas de tratamento de resíduos e de reservatório de água, no Paraná, Brasil. As estirpes analisadas fazem parte da Coleção de Micro-organismos do Laboratório de Microbiologia do Solo do IAPAR, Londrina-Pr. O DNA genômico total de cada isolado de microalga foi extraído e submetido à amplificação da PCR com gene rRNA 18S utilizando os oligonucleotídeos 18N1 (5`- ACCTGGTTGATCCTGCCA-3`), 18N1R (5`- TGATCCTTCGCAGGTTCAC-3`). Os produtos de PCR foram purificados e sequenciados em sequenciador capilar utilizando apenas o oligonucleotídeo 18N1 do gene rRNA 18S. As sequências foram avaliadas no programa BioEdit, alinhadas no ClustalX e análise filogenética realizados no programa MEGA com algoritmo neighbor-joining. Para a identificação das estirpes as sequências foram comparadas no banco de dados público NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov). As sequências obtidas tiveram tamanho de 350 à 630 pb. Na construção da árvore filogenética foram utilizadas sequências de 360 pb. As estirpes IPR-M7015, 7024 e 7025 agruparam com o gênero Chlamydomonas sp., as IPR-M7020 e 7107 tiveram a mesma similaridade e agruparam com gênero Chlorella sp. A IPR-M7014 agrupou-se com o gênero Monoraphidium sp. A IPR-M7019 ficou como um “outgroup” na árvore filogenética, no entanto, quando comparada no banco de dados NCBI teve similaridade com o gênero Chlorella sp.