Resumo

A quitina é um dos principais componentes do exoesqueleto de artrópodes e também componente estrutural essencial da parede celular de fungos filamentosos. Em geral, esse biopolímero possui uma estrutura linear constituída por unidades de N-acetilglicosaminas (GlcNAc) unidas por ligações β-1,4. A degradação da biomassa de quitina ocorre pela ação de duas classes principais de enzimas (i) quitinases, que hidrolisam as ligações β-1,4 liberando dímeros (quitobiose) e (ii) N-acetil-glicosaminidases (NAGases) que degradam a quitobiose em monômeros de GlcNAc. As quitinases pertencem à família GH18 das glicosil hidrolases enquanto que as NAgases podem pertencer as famílias GH20, GH3 ou GH84. Estas enzimas podem estar envolvidas em diversos processos fisiologicos e patológicos como o uso de quitina exógena como fonte de nutriente, remodelamento da parede celular durante o ciclo de vida fúngico, sinalização celular, entre outras. No genoma do fungo entomopatogênico Metarhizium anisopliae linhagem E6, foram encontradas quatro sequências preditas que codificam para NAGases (nag1, nag2, nag3 e nag4), sendo que nag1 e nag2 pertencem a família GH20, enquanto nag3 e nag4 pertencem à família GH3. O objetivo deste trabalho é caracterizar funcionalmente o grupo de NAGases do fungo entomopatogênico M. anisopliae. Para este fim, foram gerados mutantes nulos para estes genes. A análise fenotípica destas linhagens mutantes e bioensaios contra hospedeiros artrópdes para avaliação da participação desses genes na virulência do fungo estão sendo realizados. Também está em andamento a análise do perfil transcricional das quatro NAGases em diferentes tipos celulares (micélio, esporo, blastosporo e apressório), assim como durante o crescimento do fungo na presença de fontes de carbono quitinosas (quitina, GLcNAc e carapaça do carrapato Boophilus microplus).