Resumo

A biodiversidade brasileira abriga ampla diversidade de leveduras ainda pouco conhecidas e exploradas. Neste contexto, as leveduras contribuem tanto para a estabilidade dos ecossistemas como geração de insumos biotecnológicos, conduzindo o estudo e desenvolvimento de técnicas rápidas e reprodutíveis que promovam a substituição dos métodos tradicionais usados para identificação e tipagem de isolados. A taxonomia clássica consiste de um conjunto testes bioquímicos e fisiológicos associados a macroscopia e microscopia de culturas de levedura. A análise molecular pode ser realizada através de amplificações dos DNAs das leveduras para região GTG5, para a região ITS do rDNA e para primers espécie-específicos, além de outros que se fizerem necessários. A espectrometria de massa através da técnica de Matrix Assisted Laser Desorption/Ionisation Time-Of-Flight Intact Cell Mass Spectrometry (MALDI-TOF ICMS) é uma técnica físico-química muito rápida e confiável capaz de identificar micro-organismos em nível de espécie, e em alguns casos, diferenças intra-específicas através de picos proteicos obtidos pela ionização de proteínas de parede celular e ribossomos. O objetivo do presente trabalho foi comparar a taxonomia fenotípica clássica, através de análises morfológicas e bioquímicas, análise molecular e o novo método espectral pelo MALDI-TOF ICMS de espécies de leveduras provenientes de frutos. Foram analisados 12 isolados de leveduras pigmentadas na sua maioria espécies de Rhodotorula sp. utilizando as técnicas já citadas. Nossos resultados evidenciam que as três técnicas utilizadas no presente estudo apresentaram uma coerência de resultados. Assim a técnica de MALDI-TOF ICMS pode ser usada futuramente para identificação desses micro-organismos com uma rapidez no resultado e maior confiabilidade, entretanto detectamos que o principal obstáculo da nova técnica durante o processo de identificação é o armazenamento da diversidade microbiana através do banco de dados.