Resumo

Introdução: EPEC atípicas formam biofilmes em superfícies abióticas e em superfícies celulares pré-fixadas. Sabe-se que diversos mecanismos em E. coli são controlados por sistema de Quorum Sensing (QS), incluindo a expressão de fatores de virulência e formação de biofilme. QS é um sistema de sinalização que confere à algumas bactérias habilidade em responder a moléculas químicas, denominadas autoindutores (AI). As bactérias são capazes de produzir, liberar, detectar e responder a estas moléculas sinalizadoras e quando estes autoindutores alcançam uma concentração crítica decorrente do aumento da densidade celular, ocorre uma ativação de fatores de transcrição, alterando a expressão gênica. O receptor SdiA é responsável pela detecção de AI-1, porém E. coli não produz AI-1 detectando, portanto, AI-1 produzidas por outras bactérias. No entanto, o receptor QseC é responsável pela detecção de um composto aromático, denominado AI-3 e produzido pela própria bactéria, além de detectar hormônios humanos, epinefrina e norepinefrina. Objetivo: O objetivo deste estudo foi verificar a relação dos genes envolvidos com quorum sensing, sdiA e qseC, na formação de biofilme por aEPEC. Métodos: Os mutantes para o gene sdiA e qseC foram obtidos através de recombinação homóloga e analisados quanto a formação de biofilme em LB por períodos de 8 e 24 horas de incubação, a 30 °C e a 37 °C, através do ensaio colorimétrico com cristal violeta usando placas de poliestireno e quantificadas através de espectrofotômetro utilizando comprimento de onda de 595 nm. Resultados: A amostra ONT:H25 deletada no gene sdiA teve formação de biofilme estatisticamente maior em relação a amostra selvagem em ambos os períodos de incubação e temperaturas. No entanto, a amostra O55:H7 teve formação de biofilme estatisticamente aumentada apenas no período de 24 horas a 37 °C. Quanto as amostras deletadas no gene qseC, houve uma diminuição da formação de biofilme pela amostra O55:H7 no período de 24 horas enquanto a amostra ONT:H25 apresentou diminuição no período de 8 horas, ambas a 37 °C. Nas demais condições as amostras apresentaram resultados estatisticamente similares as amostras selvagens. Discussão: Os dados obtidos até agora mostram que os genes sdiA e qseC tem participação na formação de biofilme indicando que a sinalização através de quorum sensing pode estar envolvida na regulação de biofilme por aEPEC.