Resumo

Escherichia coli enteroinvasora (EIEC) e Shigella spp. são os agentes etiológicos da disenteria bacilar. Um conjunto específico de fatores de virulência está envolvido na invasão e colonização destas bactérias no interior das células intestinais. Nestes processos, duas proteínas são essenciais para a sobrevivência intracelular e a disseminação. Dentre elas, a proteína IcsA que se localiza em um dos polos da bactéria e é responsável pela polimerização de actina. Com a apresentação de IcsA na superfície e o seu ligamento com a outra proteína IcsB, IcsA interage com N-WASP que por sua vez recruta o complexo Arp 2/3, que polimeriza filamentos de actina. O acúmulo destes filamentos forma uma cauda na região polar da bactéria, proporcionando então uma motilidade de propulsão do microrganismo para células adjacentes. Para melhor entendimento da patogênese de EIEC, caracterizamos fenotipicamente e molecularmente 11 diferentes sorotipos dessa espécie, comparado com 2 sorotipos de S. flexneri. Para isso, foram realizados ensaios de formação de placas de lise para avaliação do fenótipo de disseminação bacteriano em células epiteliais intestinais da linhagem Caco-2. Para analise dos genes icsA e icsB, foram realizados PCR e seus produtos foram sequenciados. Após análise das sequências de nucleotídeos através do programa BioEdit, as sequências de aminoácidos pelo programa EXPASY foram analisadas, e comparamos com as sequências de S. flexneri. descritas no GenBank Nossos resultados mostraram que a capacidade de disseminação de todos os sorotipos de EIEC é significativamente menor quando comparada à S. flexneri. Além disso, também foram observadas diferenças na disseminação entre os sorotipos de EIEC. Posteriormente foram evidenciadas diferenças nas sequências peptídicas de IcsA e IcsB entre as duas espécies bacterianas e entre os sorotipos de EIEC, principalmente na região 53 a 508, onde há o recrutamento de N-WASP e na região 104 a 506 onde ocorre a interação com a Vinculina. Esses dados em conjunto, sugerem que a existência de polimorfismos nesses genes altere e/ou diminua a função dessas duas proteínas, e com isso, a grande diferença entre a disseminação de EIEC e Shigella spp e entre os diferentes sorotipos de EIEC, o que poderia estar relacionado com a gravidade da doença.