Resumo

Fusarium oxysporum é responsável pela contaminação de grãos e culturas de importância econômica, causando doenças como a podridão basal da raiz em culturas de Milho. Além disso, fungos do gênero Fusarium podem produzir várias micotoxinas que afetam a saúde de humanos. A técnica de amplificação de inter sequências simples repetidas –ISSR, utiliza sequências microsatélites, amplificando o fragmento existente entre regiões repetidas, fornecendo dados sobre muitos loci simultaneamente, e auxiliando no acesso à variabilidade genética em fungos. Este trabalho teve como objetivo analisar a diversidade genética de 16 isolados de F. oxysporum obtidos de culturas de Milho da região de Petrolina, Pernambuco. Dos isolados crescidos em meio mínimo líquido, foi obtida a biomassa, que foi filtrada para extração de DNA. As reações de amplificação com os iniciadores GTG5 e GACA4 foram feitas em volume final de 25 microlitros nas seguintes condições: Tampão da Taq DNA Polimerase, MgCl2 0,75mM, dNTP 0,25mM, 0,25 micromolar do iniciador, Taq DNA polimerase 0,1 U e 50 ng de DNA. Os ciclos de amplificação consistiram de uma etapa de desnaturação inicial a 93 ⁰ C por 5 minutos, seguida de 40 ciclos de 20 segundos a 93 ⁰C, 45 segundos a 55⁰ C e 90 segundos a 72⁰ C, seguidos por uma extensão final de 6 minutos a 72⁰ C. Após a amplificação os produtos foram separados por eletroforese em gel de agarose 1,2% utilizando marcador de peso molecular 1Kb Plus -Invitrogen Life Tecnologies. A partir dos dados obtidos foram gerados dendrogramas pelo método de agrupamento UPGMA. Os resultados evidenciaram pouca variabilidade genética intraespecífica entre os isolados testados. As amplificações com o marcador GACA4 evidenciaram 4 grupos de isolados com 100% de similaridade de tamanho de fragmentos entre si, um isolado em relação com um dos grupos ao nível de 80% de similaridade. O marcador GTG5 evidenciou apenas 2 dois grupos de similaridade de tamanho de fragmentos e 4 isolados não apresentaram relação com estes grupos ao nível de 80% de similaridade. O marcador GTG5 foi capaz de evidenciar melhor a variabilidade intraespecífica do que o GACA4. Não houve relação entre grupos de similaridade e localidades no município de Petrolina Pernambuco.