Resumo

Staphylococcus aureus é um patógeno humano oportunista responsável por grande parte dos problemas no setor alimentício e na área médica. A capacidade de formar biofilmes é um importante fator de virulência em S. aureus. Agentes antimicrobianos podem ser usados para inibir o crescimento e controlar a formação de biofilme por Staphylococcus e outros patógenos. As bacteriocinas tem sido estudadas por apresentarem amplo espectro bactericida e eventual aplicação em uma variedade de alimentos. Estas moléculas são especialmente ativas contra bactérias gram-positivas e podem exercer o efeito antimicrobiano por meio de diferentes mecanismos sendo o envelope celular o principal alvo. O objetivo deste trabalho foi estudar a susceptibilidade de S. aureus à bovicina HC5, produzida por Streptococcus bovis HC5, e seu efeito sobre a síntese de proteínas. Nove estirpes de S. aureus foram cultivadas aerobicamente em meio sintético a 37 ºC. A concentração mínima inibitória de bovicina HC5 e seu efeito sobre a adesão da bactéria em superfície de poliestireno foi avaliada em microplacas após 18 horas de incubação. Em diferentes tempos de exposição a 2 μM de bovicina HC5, proteínas recém sintetizadas foram visualizadas por marcação radioativa e eletroforese em gel 2D. A concentração mínima inibitória de bovicina HC5 sobre as diferentes estirpes de S. aureus variou de 0,8 a 1,4 μM. A presença da bacteriocina reduziu a adesão de células de S. aureus em superfície de poliestireno, sendo observada variação em função da estirpe. Bovicina HC5 interferiu na síntese de proteínas citoplasmáticas por S. aureus COL, sendo que dos 826 spots visualizados no gel 2D (pI: 4 a 7; massa: 10 a 140 kDa), 50 spots (45 proteínas) apresentaram o nível de síntese alterado (t-test, 0.05%). Enquanto a síntese de proteínas envolvidas na biossíntese de aminoácidos e purinas, transporte (SACOL2293 e SACOL1427), degradação de proteínas e peptídeos (SACOL2563) e biossíntese e degradação de mureína e peptideoglicano (SACOL1434) foi significativamente reduzida, proteínas envolvidas na biossíntese de cofatores (RibD) e pirimidinas, transporte (SACOL1457), energia (PfkA e Icd), intermediários centrais (Fhs e SACOL2296) e metabolismo de DNA (Ung) e ácidos graxos (FabF e SACOL1936) tiveram o padrão de síntese aumentada. Estes resultados sugerem que o potencial desta bacteriocina deve ser mais bem avaliado para controlar o crescimento e a formação de biofilme por S. aureus.