Resumo

Introdução: O gênero Burkholderia tem sido amplamente utilizado para fins biotecnológicos, como agentes de biocontrole, promotores de crescimento vegetal, biorremediação/biodegradação e como produtor de uma grande variedade de compostos naturais, como as pirrolnitrinas e sideróforos. No presente estudo, o endofítico de cana-de-açúcar Burkholderia sp. TC3.4.2R3 foi capaz de inibir in vitro o crescimento do fitopatógeno de eucalipto Ceratocystis fimbriata, e também controlar in planta os sintomas da podridão mole de Burkholderia gladioli em Oncidium Alowa Iwanaga, além da produção de compostos antimicrobianos em estudos paralelos, mostrando as inúmeras possibilidades de aplicação e a importância de estudos mais aprofundados dos mecanismos genéticos envolvidos. Materiais e Métodos: Uma biblioteca Tn5 de Burkholderia foi triada para identificar genes em mutantes defectivos na inibição de C. fimbriata e no controle da podridão mole. Genes fraqueadores do Tn5 nos mutantes foram clonados e sequenciados, e a análise do contexto gênico feita no genoma de Burkholderia TC3.4.2R3, sequenciado na plataforma 454 Roche FLX, montado e anotado no Artemis 14.0.0. A confirmação da associação gene nocauteado versus fenótipo será feita através da técnica de mutagênese sítio dirigida, análise da expressão gênica, e futuramente a montagem dos cassetes para expressão heteróloga, análise das proteínas e atividade biológica. Resultados e Discussão: O mutante defectivo no controle da podridão mole teve o gene nocauteado em uma região intergênica próxima ao gene da patatina, uma proteína com atividade hidrolase lipídica que atua na quebra de ácidos graxos de membrana, e pode participar do controle elicitando respostas de defesa na planta. O mutante defectivo na inibição de C. fimbriata teve o gene da 3-phosphoshikimate 1-carboxyvinyltransferase nocauteado, uma enzima que catalisa a sexta entre as sete vias da biossíntese do corismato, que é um precursor final comum de aminoácidos aromáticos, e está associado à síntese de diversos produtos naturais. A via do chiquimato está envolvida na síntese de fenazinas em Pseudomonas aeruginosa, que possui propriedades antifúngicas. Considerações finais: Os resultados parciais obtidos até o momento auxiliam a identificação aprimorada dos genes, que melhor caracterizados, poderão contribuir para o desenvolvimento de estratégias e produtos aplicáveis em diferentes áreas como a síntese de biomoléculas, geração de microrganismos recombinantes, plantas geneticamente modificadas, entre outras.