Resumo

A ordem Agaricales sofreu grandes modificações com o uso da filogenia molecular, desmistificando que somente eram os cogumelos com lâminas e estipe, o qual também afetou o gênero Agaricus. Entretanto, o baixo custo do sequenciamento está proporcionando um crescimento exponencial de sequências depositadas em banco de dados (GenBank), ocasionando falhas na identificação devido a comparação simples das sequências com os bancos (Blast), no qual existem erros e vão sendo amplificados. Os objetivos deste trabalho foram verificar na região ITS do gênero Agaricus a anotação, determinação das sequências consensos, estimativa do número de espécies moleculares, assim como sua variação. Para isso foram obtidas 665 sequências da região ITS do gênero no Genbank, realizando-se árvores filogenéticas para visualizar a formação de clados entre as sequências da mesma espécie, pelo alinhamento múltiplo (MUSCLE) das sequências em formato fasta, seguido do método da máxima verossimilhança (PhyML) e pela representação gráfica da árvore (TreeDyn). Para a determinação da variação ao longo da região ITS e a obtenção dos consensos (contigs) utilizou-se o software DNA Baser Sequence Assembler. Das 665 sequências obtidas, 496 estavam em 108 das 116 espécies no Genbank, das 200 classificadas em Agaricus. Das sequências, duas estavam com muitos “N” (uma espécie desconsiderada). 52 ficaram fora do clado da espécie anotada, das quais seis não pertenciam ao gênero, nove estavam em outras espécies e 37 podem formam 36 novas espécies moleculares. Das 169 sequências sp., 32 foram localizadas dentro de táxons já presentes no GenBank e 137 podem formar pelo menos 80 novas espécies moleculares. As representações dos táxons foram: a) de no mínimo três sequências (51 para 40 espécies - consensos); b) 22 com duas sequências; e c) 161 com uma única sequência. Foi determinado que A. brasiliensis e A. blazei, A. arvensis (consenso 01) e A. fisuratus, A. bisporatus e A. bisporus (consenso 05) são a mesma espécie molecular. As sequências consensos e sua variação serão extremamente importantes nas novas identificações moleculares e ajudarão a estimar a diversidade deste gênero de grande importância alimentar, ecológica, econômica e na saúde, além evitar erros no GenBank para pessoas menos familiarizados com as análises filogenéticas, com a identificação molecular ou trabalhos de metagenômica. Por este trabalho estimamos que há pelo menos 223 espécies moleculares nos bancos de dados até o momento.