Resumo

Identificamos duas amostras de EPECa (LB7 e BA320) pouco fagocitadas por macrófagos. O meio de cultivo destas amostras, após o fracionamento por Extração em Fase Sólida e HPLC, mostrou-se capaz de reduzir a fagocitose de bactérias, levedura e partículas de látex. Como ambas as amostras são do sorotipo O55:H7, o objetivo deste estudo foi investigar o comportamento de amostras de EPECa dos principais sorotipos, na interação com os macrófagos. Macrófagos J774.A1 foram infectados com EPECa LB5 (O26:H11), LB12 (O119:H2), LB13 (O11ab:H9), LB14 (O55:H7), BA487 (O55:H7), BA580 (O119:H2) e BA4147 (O55:H7) durante 10, 30 e 60min. A EPECa LB7 foi utilizada como controle positivo e a EPEC típica 28 (O55:H6) como controle negativo. Nesta interação, determinamos a porcentagem de macrófagos infectados e a unidade formadora de colônia (UFC). As amostras LB5, LB13, LB14 e BA580 apresentaram interação após 10, 30 e 60min semelhante à amostra LB7 que foi de 33%, 27% e 20% respectivamente. A UFC das amostras LB5, LB13 e LB14 foram também semelhantes ao controle positivo. As demais amostras (LB12, BA487, BA4147), inclusive a amostra BA580, que apresentou porcentagem de interação baixa, apresentaram UFC elevada já com 10min de infecção, semelhante ao controle negativo. A análise de ambos os parâmetros, quantidade de célula infectada e número de bactérias intracelular, é fundamental no estudo do comportamento da bactéria com fagócitos profissionais. Os resultados obtidos com a BA580 mostram isso, visto que, mesmo com baixa porcentagem de células infectadas, a quantidade de bactérias intracelular foi elevada, o que não indica capacidade antifagocítica. Além disso, a determinação da porcentagem de macrófagos infectados, mesmo que alta, pode não refletir na fagocitose aumentada já que na observação das células por microscopia de luz, nem sempre é possível diferenciar bactérias internalizadas das bactérias somente aderidas. Os resultados aqui demonstrados sugerem que outros sorotipos de EPECa, além do O55:H7 podem também apresentar capacidade antifagocítica, visto que das três amostras de EPECa menos fagocitadas, apenas uma é O55:H7, enquanto as demais são de sorotipos distintos (O26:H1, O111ab:H9), também considerados clássicos. Estes resultados sugerem que isolados de EPECa de diferentes sorotipos podem induzir efeito antifagocítico. A presença de componentes antifagocíticos no sobrenadante do cultivo destas amostras será alvo de novos estudos.