Resumo

As análises microbiológicas de produtos farmacêuticos estéreis devem ser realizadas em áreas limpas para garantir a qualidade para evitar resultados falso-positivos. A identificação de micro-organismos provenientes de áreas limpas é recomendada pela legislação e tem o intuito de promover investigações mais eficazes das possíveis fontes de contaminação microbiana e avaliar a eficácia dos procedimentos de limpeza. Com o objetivo de determinar a real diversidade das bactérias provenientes de áreas limpas, foi realizado um levantamento dos contaminantes das áreas limpas identificados no Setor de Identificação Bacteriana (SIDBAC) do INCQS/FIOCRUZ no período de 2009 a 2012. No estudo foi observado que 60 amostras bacterianas oriundas de áreas limpas pertenciam aos seguintes grupos bacterianos: bastonetes Gram positivos irregulares (BGPI) (6,66%), bastonetes Gram positivos formadores de endosporos (BGPE) (26,67%), bastonetes Gram negativos (8,33%) e cocos Gram positivos fermentadores (23,33%) e não fermentadores da glicose (26,67%). Segundo a identificação utilizando o sistema automatizado VITEK 2 (BioMerieux), os cocos Gram positivos fermentadores da glicose pertenciam a diferentes espécies de Staphylococcus (S. caprae, S. cohnii, S. epidermidis, S. equorum, S. haemolyticus, S. hominis, S. xylosus e S. warneri), Streptococcus parasanguinis e Granulicatella adjacens. As amostras bacterianas Gram negativas pertenciam às espécies Sphingomonas paucimobilis, Pseudomonas oryzihabitans e ao grupo Moraxella. Os bastonetes Gram positivos formadores de endosporos e os cocos Gram positivos não fermentadores da glicose foram caracterizados utilizando o sistema de identificação VITEK 2 e também pela análise da sequência do gene 16S rRNA. A metodologia molecular foi utilizada como referência para avaliar o sistema de identificação automatizado VITEK 2. O estudo mostrou a presença dos gêneros bacterianos de cocos Gram positivo: Arthrobacter, Barrientosiimonas, Brachybacterium, Janibacter, Kocuria, Macrococcus e Micrococcus. Interessante notar que o gênero Barrientosiimonas foi descrito no ano corrente, 2013. A maioria das amostras deste grupo pertenceu ao gênero Micrococcus, entretanto todos os outros gêneros foram identificados como pertencentes ao gênero Micrococcus ou Kocuria ou não foram identificados pelo sistema VITEK 2. Entre os bastonetes Gram positivos formadores de endosporos foram observados os seguintes gêneros: Bacillus, Cohnella, Paenibacillus, Terribacillus, Lysinibacillus, Oceanobacillus e Paenisporosarcina. Muitos gêneros e espécies dos grupos bacterianos avaliados pela análise da sequência do gene 16S rRNA não são contemplados no banco de dados do sistema de identificação VITEK 2. A ampla diversidade das bactérias de áreas limpas dificulta a identificação de alguns grupos bacterianos comumente encontrados neste ambiente pelo sistema automatizado VITEK 2.