Resumo

A criptococose tem sido amplamente citada como uma infecção importante, a doença afeta principalmente os pulmões, podendo ser disseminada pela via hematogênica e causar meningite e encefalite. Um diagnóstico rápido e correto da criptococose é essencial, uma vez que a doença causada pela espécie Cryptococcus gattii exige uma terapia antifúngica prolongada. A nanotecnologia agrega novas formas de análises, custo reduzido, mais rápido e preciso em termos de diagnóstico de doenças. A técnica permite identificar a presença de um fragmento genético associada a nanopartículas com precisão em uma quantidade mínima de amostra. Diante do exposto, o objetivo deste trabalho foi desenvolver a técnica de nanopartículas de ouro (AUNPs) para detecção de isolados de C. gattii a partir do DNA de amostras clínicas. Foram utilizadas DNA de 21 amostras clínicas de C. gatti e 04 amostras clínicas de C. neoformans. DNA de cepas de referência dos oito tipos moleculares pertencentes ao complexo C. neoformans/gattii foram utilizadas como controles (WM 148, WM626, WM628, WM629, WM179, WM178, WM161 e WM779). Para a especificidade, foram utilizados DNA de Candida albicans, Malassezia pachydermatis, Conidiobolus lambrauges, Aspergillus fumigatus e Pichia sp. Primers a partir de regiões do gene superóxido dismutase (SOD1) associados a AuNPs, foram utilizados para hibridização e detecção específica, permitindo um diagnóstico visual baseado em propriedades colorimétricas das partículas e uma leitura em espectrofotômetro de absorção em medidas de 480nm a 720nm. A técnica permitiu detectar C. gattii das 21 amostras clínicas e nas 04 cepas padrões de C. gattii utilizadas como controles. As amostras clínicas e cepas padrão de C. neoformans bem como os fungos utilizados para a especificidade foram negativos para a técnica de AUNPs. A técnica tem sido utilizada na detecção de patógenos como Mycobacterium tuberculosis,com bons resultados de sensibilidade/especificidade. Observou-se com este estudo que a técnica de AUNPs foi rápida de baixo custo e específica na detecção do C. gattii, entretanto ensaios para verificar a sensibilidade da técnica devem ser realizados para futuramente ser empregada como um teste diagnóstico.