Resumo

Staphylococcus aureus estão comumente envolvidos em infecções de pele/tecidos moles, podendo ainda causar doenças disseminadas e graves, representando um problema global de saúde pública. A capacidade desses microrganismos de formar biofilme está frequentemente associada à colonização de dispositivos médicos invasivos e à ocorrência de infecções recorrentes/persistentes. Alguns estudos demonstraram que tanto interleucina-1β (IL-1β) como o fator de necrose tumoral α (TNFα) poderiam levar ao aumento do biofilme de S. aureus. Assim, o objetivo deste trabalho foi investigar este fenômeno, através de modelos in vitro (utilizando microplacas de poliestireno inerte) e in vivo (utilizando cateteres implantados no dorso de camundongos). Nossos estudos demonstraram que no modelo in vitro a amostra de S. aureus resistente à meticilina (MRSA), designada NY/J 19335, pertencente ao ST5-SCCmecII, apresentou um aumento significativo no biofilme, de aproximadamente 2 log, após tratamento com 10ng/poço da citocina. Um maior acúmulo do biofilme foi observado após tratamento com IL-1β, obtendo, portanto, uma significância estatística mais elevada (p=0,0001) quando comparado àquele promovido pelo tratamento com TNFα (p<0,01). Por outro lado, o tratamento da amostra NY19335 com a combinação das duas citocinas (5ng/mL cada) ocasionou um aumento estatisticamente significativo no número de UFC/mL, em relação ao grupo controle não-tratado (p=0.001). Entretanto, tal aumento não foi sinérgico. Nos estudos in vivo, após a cirurgia para implantação dos segmentos de cateter, os camundongos foram novamente anestesiados nos dias 1 e 2, pós-implantação (dpi), para que pudessem receber uma injeção de citocina no interior dos segmentos. Assim, uma suspensão contendo 200ng (2 μg/mL) da citocina (IL-1β ou TNF-α) em água bidestilada foi administrada diretamente no lúmen de cada cateter, com o uso de seringas de 0,1 mm de diâmetro. Após o terceiro dia da implantação, o cateter foi retirado e as bactérias aderidas contadas (CFU/mL). Tal tratamento levou a um aumento de aproximadamente 1 log no número de UFC/mL do biofilme da amostra NY19335. A significância estatística deste aumento foi elevada, para ambas citocinas (p=0,0001). No momento estamos realizando estudos de expressão gênica visando à compreensão dos mecanismos envolvidos no aumento quantitativo do biofilme desencadeado por tais citocinas.