Resumo

Ureases catalisam a hidrólise da ureia em amônia e dióxido de carbono, sendo sintetizadas por plantas, fungos e bactérias. No solo, a urease é encontrada em microrganismos, raízes de plantas e como uma enzima extracelular ligada a compostos orgânicos e inorgânicos. Resultados anteriores do grupo com a isoforma de urease de Canavalia ensiformis, a canatoxina, e com urease de Helicobacter pylori mostraram que essas proteínas são quimiotáticas para neutrófilos e outras células pró-inflamatórias. Considerando esses dados, avaliamos a hipótese de uma possível atividade quimiotática da urease ubíqua de soja (uSBU), enzima presente nas raízes de soja, sobre Bradyrhizobium japonicum, uma bactéria do solo que forma nódulos fixadores de nitrogênio em plantas de soja. Com esse objetivo, foram utilizadas três estirpes de B. japonicum, USDA110 (tipo selvagem), ∆ureG (ausência de atividade ureásica) e ∆ureABC (ausência de urease), e três ureases vegetais, a uSBU, a embrião-específica de soja (eSBU) e a de C. ensiformis (JBU). Os ensaios de quimiotaxia foram realizados em câmara de Boyden. O compartimento inferior da câmara foi preenchido com 10⁶ células/mL de B. japonicum e o compartimento superior com ureases vegetais ou com proteínas controle, todos na concentração de 3 µM. Tais ensaios demonstraram uma maior atração exercida pelas ureases vegetais sobre as células bacterianas, quando comparadas aos controles. Em contraste, a urease de B. japonicum parece não influenciar a quimiotaxia, já que as bactérias mutantes responderam de maneira semelhante à bactéria tipo-selvagem. Para avaliar a influência da atividade enzimática das proteínas vegetais na quimiotaxia, as mesmas foram tratadas com um inibidor irreversível, o p-hidroximercuribenzoato. A resposta de B. japonicum a ureases enzimaticamente ativas e a ureases inibidas foi semelhante, sugerindo que esse fenômeno ocorre de maneira independente da atividade ureolítica. Deste modo, concluímos que o efeito quimiotático de ureases vegetais é percebido também por bactérias, além de células eucariotas como neutrófilos e monócitos, e consiste em mais uma atividade biológica das ureases que independe de sua atividade catalítica.