Resumo

Acanthamoeba polyphaga mimivirus (APMV) é um vírus gigante de DNA com cerca de 700 nm de diâmetro e genoma de 1,2 Mb. Ele foi isolado no inicio dos anos 2000 parasitando uma ameba do gênero Acanthamoeba, presente em uma amostra de água de uma torre de resfriamento de um hospital da cidade de Bradford, Inglaterra. Estudos recentes demonstram que APMV é capaz de se multiplicar em fagócitos murinos e humanos e pode ser um hipotético patógeno humano causador de pneumonia. No entanto, há poucos dados quanto à relação de APMV com as defesas do hospedeiro. Sendo assim, este estudo teve por objetivo investigar como alguns dos componentes do sistema interferon (IFN) são estimulados por APMV em células mononucleares do sangue periférico (PBMCs). Para isso, PBMCs humanas cultivadas em placas de 6 poços (1.000.000 células/poço) foram infectadas com APMV (infeccioso ou inativado por UV) na m.o.i. de 10. Células e sobrenadante foram coletados, processados e submetidos a ensaios de PCR em tempo real, ELISA e Western-Blot para verificar a indução de IFNs do tipo I, interferon alfa (IFNA2) e interferon-beta (IFNB1) e genes estimulados por IFNs (ISGs), MX1 e IFI6. Foi também realizada uma pesquisa de possíveis viroreceptores presentes no genoma de APMV e verificada a sensibilidade de APMV à IFNs do tipo I. Nossos resultados demonstram pela primeira vez que APMV é capaz de se replicar em PBMCs humanos totais. PCR em tempo real e ELISA revelaram que APMV induz mRNAs de IFNs do tipo I nestas células após 18 horas de infecção. No entanto, APMV é capaz de inibir a indução dos ISGs verificados por um mecanismo independente de viroreceptores e da fosforilação de STAT-1. Foi também verificado que APMV é resistente a ação antiviral de IFNA2, mas sensível à ação antiviral de IFNB1. Concluindo, nossos resultados confirmam estudos prévios que demonstram a infecção produtiva de fagócitos por APMV e também indicam, de forma inédita, que este vírus é reconhecido pelo sistema imune de vertebrados, fornecendo os primeiros dados a cerca da interação entre APMV e o sistema IFN, o que levanta novas e relevantes questões evolutivas sobre a interação deste vírus gigante e hospedeiros vertebrados.