Resumo

As leishmanioses são um grupo de doenças infecciosas causadas por diferentes espécies do gênero Leishmania, e afetam cerca de 2 milhões de pessoas por ano. Drogas antimoniais pentavalentes representam a primeira linha no tratamento das infecções por Leishmania, sendo anfotericina B e pentamidina drogas alternativas. Tais agentes são caros, requerendo longa administração parenteral, produzem sérios efeitos colaterais, e a resistência a esses componentes vem se mostrando um grande problema atualmente. Desta forma, é crescente a busca pelo desenvolvimento de novos medicamentos, bem como a combinação entre drogas, contribuindo para o menor desenvolvimento de resistência. Nesse contexto, o uso de inibidores de calpaínas (cisteína-peptidases neutras dependentes de cálcio) aparece como alternativa interessante de tratamento. Dentre estes inibidores, é conhecido o MDL28170, um potente inibidor de calpaínas, como eficaz contra Leismania amazonensis. Nosso trabalho pretende avaliar a combinação do MDL28170 e da anfotericina B sobre a cepa PH8 de Leishmania amazonensis. Formas promastigotas foram incubadas em concentrações crescentes de cada composto, e quantificadas diariamente por 96 h. Após a determinação dos valores do IC50 para cada composto (6 µM para o MDL 28170; 0,01 µg/mL para a anfotericina B), foram avaliadas três combinações das drogas: mantendo-se constante o valor de ¼ IC50 da anfotericina B, foram utilizados os valores de ¼, ⅓ e ½ IC50 do MDL28170. Em todas as combinações, foi observado um efeito aditivo, e a menor concentração das drogas em combinação que permitiu a observação de alterações morfológicas em microscopia óptica foi aquela utilizando ½ IC50 do MDL28170 combinado com ¼ IC50 da anfotericina B. Foi também constatado um efeito leishmanicida desta combinação das drogas sobre o parasito. Por microscopia eletrônica de varredura, verificamos que esta combinação de drogas levou a alterações significativas na superfície celular, com células arrendondadas e formação de blebs de membrana. Estes dados podem permitir a diminuição da concentração de anfotericina B para o tratamento de leishmanioses em combinação com inibidores de calpaínas, e assim diminuir os efeitos colaterais associados. Posteriormente serão feitos testes em culturas de macrófagos para verificar o efeito dos compostos combinados na interação com o hospedeiro vertebrado.