Resumo

Introdução: A infecção causada pelo vírus da dengue (DENV) esta associada à plaquetopenia, e aumento da permeabilidade vascular, resultando em extravasamento de plasma, podendo ser fatal. Esses achados apontam o endotélio vascular como um tecido chave na patogênese da dengue. Células endoteliais são permissivas a infecção por DENV e a infecção dessas células induz ativação e morte celular. Infecções virais geram respostas de estresse celular, incluindo modulação da síntese de proteínas, e morte celular. Essas podem ser resultado da produção de diferentes mediadores, como compostos reativos de nitrogênio (NO) e de oxigênio (ROS). A regulação da tradução envolve a estocagem de RNAm no citoplasma, em estruturas conhecidas como grânulos de estresse (SG), cuja formação pode ser induzida por alterações do potencial redox celular, sugerindo que a indução de ROS por uma infecção viral pode levar a formação de SG e controle da síntese proteica. Nesse estudo, investigamos se a infecção celular por DENV leva a produção de ROS e/ou a formação de SG, e o papel desses elementos no controle da replicação viral e morte celular. Metodologia: Para avaliação do papel de SG, foram utilizadas células MEFs (fibroblasto embrionário murino) selvagens (wt) knocking (KI), a qual não produz SG. Como modelo de células endoteliais foram utilizadas células de endotélio microvascular cerebral humano (HBMECs) e todos os tipos celulares foram infectados com DENV2 (cepa 16681). A produção de ROS foi avaliada por citometria de fluxo e a replicação viral, foi analisada por qRT-PCR. A morte celular foi avaliada por ensaio de XTT. Resultados: A análise da infecção de células MEFs demonstrou que a maior replicação viral e morte celular das células que não produzem SG (Ki) em relação as células wt. Além disso, a infecção das células wt levou a produção de ROS, que foi menos evidente nas células Ki. A infecção de HBMECs com DENV induziu produção de ROS, de maneira dependente de replicação viral, entretanto, não foi observado aumento significativo da formação de SG nessas células. Conclusão: Esses dados sugerem que ROS e SG tenham um efeito protetor para célula, inibindo a replicação viral e, consequentemente, a morte celular. Pretendemos investigar a correlação entre a produção de ROS e formação de SG em células endoteliais, e avaliar o papel desses eventos na modulação da infecção dessas células.