Resumo

A criptococose é uma micose sistêmica causada por uma levedura pertencente ao complexo Cryptococcus neoformans , cujos membros são C. neoformans e C. gattii. Essas duas espécies são divididas de acordo com a especificidade antigênica do polissacarídeo capsular e análise filogenética em cinco sorotipos (A, B, C, D e AD) e mais raramente têm sido relatados os sorotipos BD e AB. O gênero, um representante dos basidiomicetos heterotálicos, possui dois mating types (α e a) determinados em um único locus MAT, com dois alelos. Diferenças genéticas têm sido detectadas entre as variedades desse gênero através de métodos moleculares e tem sido essenciais para se entender a biologia do fungo. Nesse sentido, o objetivo geral desse trabalho foi avaliar a variabilidade genética de amostras do complexo C. neoformans isolados de casos de meningite, diagnosticados no Hospital Especializado Couto Maia, Salvador-BA, no período de 2006 a 2011, validando uma técnica rápida de extração de DNA de leveduras. A extração de DNA foi realizada através da fervura de uma suspensão fúngica e a determinação do mating type, das variedades, da ploidia e do sorotipo através da técnica da Reação em Cadeia da Polimerase associada ao Polimorfismo do Tamanho do Fragmento de Restrição (PCR-RFLP). A técnica de extração do DNA genômico por fervura foi bem reproduzida e, após ter sido empregada diretamente na reação da PCR, foi possível observar que nenhuma diferença houve com relação aos produtos da PCR com DNA extraído pela técnica tradicional. Dos 94 isolados analisados, a determinação de mating types e da ploidia mostrou que todos apresentaram padrão compatível com mating type α, assim como haploidia. A técnica molecular de sorotipagem permitiu observar que 88% dos isolados eram da variedade grubii (sorotipo A) e 12% da variedade gattii (sorotipo B). Nossos resultados mostram como se pode facilitar a PCR de leveduras com uma técnica que envolve um menor tempo de execução e menor custo, além de contribuir para a epidemiologia da criptococose, no que se refere à importância de se ter um diagnóstico diferencial entre as variedades envolvidas no processo infeccioso.