Resumo

INTRODUÇÃO O Complexo Mycobacterium tuberculosis (CMT) é formado por um grupo de espécies causadoras de tuberculose em diferentes animais. Dentro deste complexo encontra-se o Mycobacterium bovis, agente zoonótico causador da tuberculose bovina (TB), que pode ocasionar impactos econômicos e risco iminente à saúde humana. Sua detecção é atualmente realizada através de testes de tuberculinização e vigilância nos abatedouros, no entanto estes procedimentos podem apresentar resultados errôneos. Uma alternativa que permite a identificação rápida e específica de CMT em fragmentos de lesões suspeitas de TB são os ensaios de nested real-time PCR (nested q-PCR), aumentando a especificidade e reduzindo o tempo de diagnóstico. Sendo assim o objetivo deste estudo foi avaliar o uso da nested q-PCR na inspeção post-mortem de carcaças com lesões suspeitas de tuberculose bovina. METODOLOGIA Foi acompanhado o abate e inspeção sanitária de 41.193 bovinos em matadouros frigoríficos detentores de Serviço de Inspeção Federal (SIF), localizados no estado de Mato Grosso. Um total de 198 (0,48%) apresentaram lesões suspeitas de TB, sendo todas estas amostras submetidas à cultura, multiplex PCR (m-PCR) e nested q-PCR. A m-PCR utilizou as sequências alvo IS6110 específica para o CMT e RvD1Rv2031c específica para M. bovis e para a nested q-PCR foi utilizada a sequência alvo Rv2807 específica para CMT. RESULTADOS E DISCUSSÃO Na bacteriologia foi possível isolar CMT e M. bovis em 1,5% (03/198) lesões. Na m-PCR detectou-se a presença de CMT e M. bovis em 7,0% (14/198) amostras, permitindo evidenciar o bacilo nas mesmas 03 amostras confirmadas pela cultura. Na nested q-PCR foi possível detectar 28,2% (56/198) de amostras positivas. Realizando a comparação entre a bacteriologia, m-PCR e nested q-PCR, foi possível observar que nested q-PCR apresentou-se 18 vezes mais sensível que a bacteriologia e 4 vezes mais sensível que a m-PCR, na detecção de CMT em lesões suspeitas de TB. CONCLUSÃO A nested q-PCR demonstrou ser uma técnica muito sensível e capaz de detectar lesões infectadas com CMT em apenas 10 horas de trabalho, podendo ser empregada como método complementar de inspeção a fim de contribuir com o Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e da Tuberculose Animal (PNCBT).