Resumo

No Brasil, a demanda por produtos florestais tem levado ao aumento de florestas plantadas que chegam atualmente a 7.000.000 ha, dos quais 74,8% são de Eucalyptus e 25,2% de pinus. Da área plantada com Eucalyptus no Brasil (4.873.952 ha), 54,2% está concentrado na região Sudeste, sendo o Estado de Minas Gerais um dos principais produtores. Grande parte das plantações de eucalipto situam-se em solos de baixa fertilidade, onde a fertilização e a ciclagem de nutrientes são fundamentais para elevar e manter a produção florestal. Dessa forma, alguns microrganismos, como as bactérias diazotróficas, podem estar diretamente relacionados com a adaptação do eucalipto ao ambiente e estar contribuindo para o suprimento de quantidade considerável de N para as plantações de eucalipto no Brasil. Assim os objetivos deste trabalho foram avaliar a presença e identificar os principais grupos de bactérias diazotróficas em florestas plantadas de Eucalyptus urograndis na região leste de Minas Gerais, Brasil, nas estações de inverno e verão, em áreas que receberam ou não adição de N. Utilizou-se a técnica de Nested PCR-DGGE a partir do gene nifH. O DNA total do solo e do sistema radicular foi extraído e amplificado pela reação de PCR com os primers 19F e 407R. Em seguida foi realizado o Nested PCR com os primers 278R e 19F-GC, e o amplificado foi aplicado no gel de DGGE. O gel foi submetido à eletroforese vertical por 12 h a 60 V à temperatura de 60 °C e, posteriormente, corado por 40 min com SYBR Gold (1x). As bandas de interesse foram excisadas, eluídas e submetidas a uma nova reação de PCR para serem sequenciadas. A amplificação do gene nifH foi realizada com sucesso para as amostras de solo e sistema radicular, permitindo a análise do amplicon pela técnica de DGGE. Os perfis das comunidades de bactérias fixadoras de N foram influenciados pelas estações de inverno e verão e/ou adubação nitrogenada. Os principais grupos de bactérias diazotróficas econtrados pertencem à Classe Alfaproteobacteria. No entanto, a maioria das espécies que foram encontradas nas amostras de solo não foram encontradas no sistema radicular e vice-versa. O gênero Bradyrhizobium predominou nas amostras de solo e o gênero Hyphomicrobium no sistema radicular. Diferenças encontradas com relação à população de diazotróficas identificadas neste estudo mostram a importância de se avaliar a população ativa no ambiente, pois são elas as grandes responsáveis pela Fixação Biológica de Nitrogênio (FBN).