Resumo

A murcha-de-curtobacterium, causada por Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens (Cff), é considerada atualmente uma das principais doenças bacterianas da cultura do feijoeiro no Brasil. A bactéria ataca todas as partes da planta acima do solo, podendo levá-la a morte, resultando assim em queda na produtividade da planta. Os sintomas típicos da doença em feijoeiro são principalmente murcha, escurecimento vascular e morte da parte aérea. O controle desta fitobactéria está fundamentado no uso de cultivares resistentes, rotação de culturas e uso de sementes sadias. Nos últimos anos o interesse por produtos naturais para controle de patógenos de plantas tem sido estimulado por tendências na agricultura em relação a maior sustentabilidade e preocupação pública sobre o uso de pesticidas perigosos. Neste sentido, este estudo teve como objetivo avaliar a atividade antibiótica de um composto isolado do metabolismo secundário da cepa antagonista Pseudomonas aeruginosa LV sobre o isolado 12771 de Cff. O processo de produção e extração do composto antibiótico obtido do metabolismo secundário da cepa LV foi patenteado e está registrado como: Patente PI0803350-1 – INPI 12/09/2008; http://www.inpi.gov.br. O composto antibiótico denominado de F4A (fração AcOEt/CH2Cl2 - [1:1]) foi obtido por cromatografia liquida em coluna de sílica. A determinação da concentração inibitória mínima (CIM) foi realizada em placas de 96 poços, 10 concentrações do antibiótico F4A foram testadas sendo elas 500, 250, 125, 62.5, 31.25, 15.625, 7.812, 3.90, 1.95 e 0.97 μg/mL. Como controle negativo foi usado caldo nutriente e como controle positivo uma suspensão de Cff. Foram adicionados em cada poço 100µL da curva de concentração e 100 μL da suspensão de Cff ajustada para 108 UFC/mL. As placas foram incubadas a 28 °C por 48 h em seguida foi adicionado 10 μL de uma solução de cloreto de 2, 3, 5-trifenil tetrazólio (TTC) a 1% e incubadas a 28ºC por 20min. Os resultados foram obtidos em leitor de microplacas Asys UVM 340 e por alteração da cor pelo revelador de viabilidade celular TTC. Foi considerado sensível (-) na ausência de cor e resistente (+) na presença de coloração avermelhada. A CIM foi de 15,5 μg/mL sugerindo assim que o antibiótico produzido pela cepa LV surge como uma importante alternativa para o controle da murcha-de-curtobacterium, no entanto estudos in vivo devem ainda devem ser realizados.