Resumo

Com o crescente aumento de cepas de Candida spp. resistentes a antifúngicos, torna-se importante e necessário a realização de pesquisas que avaliem os efeitos de novos métodos terapêuticos, como a Terapia Fotodinâmica (TFD), sobre fatores de virulência desse gênero. A produção das enzimas hidrolíticas aspartil-proteinase (SAP) lipase (LIP) e fosfolipase (PL) é considerado um importante fator de virulência de C. albicans. Assim, o objetivo deste estudo foi verificar os efeitos da Terapia Fotodinâmica sobre biofilmes de Candida albicans, avaliando seus efeitos sobre a expressão dos genes SAP5, PLB2 e LIP9 pela levedura. Foi utilizado um isolado clínico de Candida albicans, o qual foi coletado de pacientes portadores de HIV e está armazenado no laboratório de Microbiologia e Imunologia do Instituto de Ciência e Tecnologia, UNESP - Univ Estadual Paulista. A quantificação da expressão dos genes foi relacionada à produção de enzimas hidrolíticas (SAP5, PLB2 e LIP9) na amostra clínica utilizando-se o ensaio de RT-PCR em tempo real. A presença e a expressão dos genes foram analisadas com e sem a realização da terapia fotodinâmica. Para a terapia fotodinâmica foi utilizado laser de gálio-alumínio-arseneto de baixa potência (vermelho visível, 660 nm) como fonte de luz e o corante azul de metileno a 300 µM, como fotossensibilizador. Foram avaliados quatro grupos experimentais para cada cepa: a) F+L+: sensibilização com azul de metileno e irradiação com laser; b) F+L-: somente tratamento com azul de metileno; c) F-L+: somente irradiação com laser e d) F-L-: grupo controle, sem sensibilização com azul de metileno e ausência de luz. Os resultados obtidos foram analisados estatisticamente pelo Software do equipamento de real-time. O isolado clínico apresentou um resultado no qual a expressão dos genes alvos foi diminuída com a sensibilização à TFD. A expressão do gene SAP5 diminuiu ~43X, ~62X e ~79X nos grupos F+L-, F-L+ e F+L+, respectivamente. O gene LIP9 teve sua expressão diminuída em ~28X, ~35X e ~72X nos grupos F+L-, F-L+ e F+L+, respectivamente. E a expressão do gene PLB2 diminuiu ~14X, ~32X e ~58X nos grupos F+L-, F-L+ e F+L+, respectivamente. Em todos os casos a expressão dos genes alvos foi menor com a TFD, sugerindo que esse tratamento diminui os fatores de virulência de C. albicans e que pode ser uma opção ou um tratamento coadjuvante à quimioterapia antimicrobiana, melhorando o tratamento de infecções orais, aumentando a eficácia e reduzindo seu custo.