Resumo

As leveduras do gênero Candida são responsáveis pela maioria das infecções fúngicas oportunistas em ambientes hospitalares e com o aumento destas infecções no Brasil e em muitos países uma correta identificação dos isolados faz-se necessária, principalmente pela ocorrência de espécies crípticas do complexo psilosis, que são morfologicamente idênticas, mas geneticamente diferentes, podendo apresentar diferentes perfis epidemiológicos, clínicos e de susceptibilidade a drogas. Para isso,os inteins(internal proteins)que são elementos genéticos considerados parasitas tem se mostrado eficientes, pois, além de apresentarem importantes implicações evolutivas, biotecnológicas e terapêuticas,são excelentes marcadores moleculares para diferenciar as espécies deste complexo. Isso é possível, pois estão localizados em genes conservados, possibilitando o desenho de primers para sua amplificação por PCR. Além disso, alguns inteins podem apresentar uma região de homingendonuclease (HE) no interior no gene, podendo ser variáveis entre espécies próximas, como no caso do complexo psilosis. Foi desenhado um par de primers degenerados, baseados no alinhamento da região do extein5’ e 3’ do gene VMA de C. parapsilosise C. orthopsilosis, seguido de sua amplificação em 46 isolados de C. parapsilosis, 17 de C. metapsilosis e 22 de C. orthopsilosis. Foram obtidos fragmentos de 319pb para C. parapsilosis, referente ao gene VMA, pois esta espécie não possui intein VMA,1.681 pb para C. metapsilosis e 1.909 pb para C. orthopsilosis, as quais apresentam full-lengthinteins, ou seja, com o domínio HE. A variação e distribuição dos inteins VMA no complexo psilosis permitiram a diferenciação destas espécies de forma rápida, fácil e com um baixo custo, podendo ser utilizado em laboratórios de diagnóstico clínico.