Resumo

A tuberculose (TB) constitui um sério problema de saúde pública no Brasil e no mundo. O agente etiológico é o Mycobacterium tuberculosis (MT) e a forma clínica mais comum é a pulmonar. O diagnóstico laboratorial da TB é realizado pela baciloscopia (BAC) e cultura (CULT). Devido à baixa sensibilidade da BAC e ao tempo prolongado para a obtenção da CULT, a PCR em tempo real (qPCR) vem sendo empregada com frequência no diagnóstico da TB. Considerando que a rapidez no diagnóstico é essencial para o tratamento da TB, diminuindo a disseminação e controlando a doença, este projeto propõe avaliar o desempenho da qPCR na detecção do MT em amostras de escarro de pacientes com suspeita de TB pulmonar, em comparação aos métodos de BAC e/ou CULT. No período de agosto a outubro de 2012, 317 amostras de escarro foram encaminhadas ao Laboratório Regional de Santo André do Instituto Adolfo Lutz (IAL) para a realização de BAC e CULT. Após estes procedimentos, uma alíquota de cada amostra foi enviada ao Núcleo de Tuberculose e Micobacterioses - IAL Central (SP) para realização de: 1. descontaminação e fluidificação do escarro pelo método de NALC-NaOH, 2. extração de DNA e 3. qPCR in house para detecção do gene mpt64, específico para o Complexo Mycobacterium tuberculosis (CMT). A sensibilidade, especificidade e acurácia da qPCR foram calculadas em relação à BAC e/ou CULT. Das 317 amostras analisadas, 298 (94%) foram negativas e 19 (6%) positivas na BAC e/ou CULT. Destas, 16 (84,2%) foram positivas e 3 (15,8%) negativas para o CMT na qPCR. As culturas destas 3 amostras negativas foram submetidas à identificação da espécie. Uma foi identificada como M. intracellulare, confirmando a especificidade da qPCR; outra está em processo de identificação, mas o paciente foi diagnosticado e tratado para TB; e a última não foi possível identificar por motivo de contaminação na cultura, sendo considerado um resultado falso-negativo, pois o paciente foi tratado para TB. Das 298 amostras negativas na BAC e/ou CULT, a qPCR não detectou o CMT em 293 (98,3%) delas, enquanto 5 (1,7%) foram positivas. Destas 5 amostras, uma é de um paciente diagnosticado, notificado e tratado para TB um mês após a entrada da amostra no laboratório e o restante são amostras falso-positivas. A qPCR mostrou sensibilidade de 84,2% (IC 95%; 62,4-94,5), especificidade de 98,3% (IC 95%; 96,1-99,3) e acurácia de 97,5% (IC 95%; 95,1-98,7), demonstrando ser um teste útil para o diagnóstico rápido de TB pulmonar.