Resumo

Clostridium perfringens é causador de enterite necrótica (EN), uma grave doença que afeta a indústria avícola mundial. É classificado em cinco toxinotipos baseados na produção de quatro toxinas principais (alfa, beta, epsilon, e iota). Além disso, C. perfringens produz outras potentes toxinas (NetB, CPE, Beta-2) que danificam seriamente a mucosa intestinal, causando lesões severas e pelas perdas econômicas importantes. A toxina TpeL (Toxin Clostridium perfringens large cytotoxin), classificada como parte da família das LCTs (Large Clostridial Cytotoxins), é uma das últimas toxinas de C. perfringens a ser identificada nas enterites de interesse veterinário. A proteína purificada de TpeL tem demonstrado sua atividade de glicosiltransferase e efeito citotóxico característico em linhagens celulares. Desta forma, o objetivo deste estudo foi verificar a presença do gene tpeL e o efeito citotóxico em cultura de células, em C. perfringens provenientes de casos de EN aviária. Das 22 cepas de C. perfringens tipo A analisadas, 7 (31,8%) foram positivas para o gene tpeL. Os produtos de PCR foram sequenciados e verificou-se homologia de 99% com base no BLAST. O teste citotóxico foi realizado em células Vero com os sobrenadantes das respectivas bactérias, em duplicata, e repetido duas vezes, independentemente. O efeito citotóxico foi observado após 72 h de incubação, produzindo estiramento e arredondamento celular, característico do efeito da toxina TpeL, o que foi verificado em todos os sobrenadantes avaliados. A presença deste gene tpeL em C. perfringens tipo A constitui-se o primeiro relato no Brasil. Estudos adicionais sobre o papel desta toxina na patogênese da EN aviária vêm sendo conduzidos em nosso laboratório. Apoio Financeiro: CNPq 143387/2008-1; FAPESP 2012/10659-7. E-mail: llanco.luis@usp.br; vivinkn@usp.br; aline.ignacio@usp.br; mariojac@usp.br