Resumo

Candida orthopsilosis, uma das espécies constituintes do atual complexo C. parapsilosis, pode infectar tecidos humanos e também formar biofilmes. Alguns estudos têm investigado o perfil proteico bem como as rotas metabólicas envolvidas em biofilmes gerados por espécies de Candida. Neste estudo, pretendeu-se avaliar a expressão das proteínas dos biofilmes maduros de C. orthopsilosis em comparação às células planctônicas. Para tanto, eletroforese bidimensional e espectrometria de massas (MALDI TOF-TOF) foram utilizadas e com o auxílio da bioinformática, realizou-se também o mapeamento das proteínas identificadas em diferentes rotas metabólicas. As rotas associadas ao metabolismo de carboidratos englobaram a maior quantidade de proteínas, sendo que à glicólise/gliconeogênese associaram-se 20 e 19 proteínas; ao ciclo de Krebs, 15 e 16; à via das pentoses, 10 e 10 e à fosforilação oxidativa, 3 e 4 proteínas nas células do biofilme e planctônicas, respectivamente. As cinco proteínas mais expressas no crescimento em biofilme foram: gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase (GAPDH - EC 1.2.1.12), fosfoglicerato quinase (Pgk1 – EC 2.7.2.3), transaldolase (Tal1 – EC 2.2.1.2), piruvato descarboxilase (Pdc11 - EC 4.1.1.1) e enolase (Eno1– EC 4.2.1.11), enquanto que na forma planctônica, GAPDH, Pdc11, piruvato cinase (Cdc19 – EC 2.7.1.40), alcool desidrogenase (Adh1 – EC 1.1.1.1) e Pgk1 foram as principais. As enzimas: 1-epimerase (EC 5.1.3.3) e acetato-CoA ligase (EC 6.2.1.1); succinato desidrogenase (EC 1.3.99.1) e succinil-CoA sintetase (EC 6.2.1.5); ribose-5-fosfato-isomerase (EC 5.3.1.6) foram exclusivas do crescimento biofilme nas rotas glicólise/gliconeogênese, ciclo de Krebs e via das pentoses, respectivamente. Na fosforilação oxidativa foram encontradas comumente as enzimas pirofosfatase inorgânica (EC 3.6.1.1) e ATP sintase (EC 3.6.3.6); succionato desidrogenase (EC 1.3.99.1), apenas no biofilme e as enzimas: coenzima Q-citocromo c redutase (EC 1.10.2.2) e citocromo c oxidase (EC 1.9.3.1) foram exclusivas da forma planctônica. Nossos resultados sugerem que o metabolismo de carboidratos tenha uma função essencial para a formação e manutenção dos biofilmes de C. orthopsilosis, pois diferentes níveis de expressão e proteínas metabólicas específicas são biofilme-dependente.