Resumo

Biofilmes podem ser formados por quase todos os tipos de microrganismos, sob condições favoráveis, sendo que vários microrganismos são capazes de aderir e formar biofilmes em diversos tipos de superfícies. Dentre todos os microrganismos, são as bactérias que mais frequentemente formam biofilme, ainda que algumas espécies apresentem maior aptidão que outras. A formação do biofilme pode ser influenciada pelo meio que envolve o microrganismo, pela superfície envolvida, pela espécie e até mesmo pelas características genéticas do microrganismo dentro de uma mesma espécie. O presente trabalho avaliou a capacidade de formação de biofilme de diferentes cepas de Bacillus cereus sobre superfície de poliestireno. Para determinação da capacidade de formação do biofilme foi utilizado a técnica de crescimento em microplaca de poliestireno com 96 cavidades onde foi adicionado o volume de 150 µL de BHI e 50 µL do inóculo bacteriano na concentração de, aproximadamente, 8 Log UFC.mL-1 por cavidade. O controle negativo de formação do biofilme foi representado por cavidades contendo apenas 200 µL do substrato, sem a adição do inóculo bacteriano. A microplaca foi incubada a 32 °C durante 48 horas. Posteriormente, foi removido o meio de cultivo e adicionado 200 µL cristal violeta (0,1% p/v) para corar as células sésseis, em seguida o cristal violeta foi removido e adicionado de 200 µL de etanol 95% (v/v) e após 10 minutos, o conteúdo das cavidades foi homogeneizado e removido para novas cavidades estéreis de uma nova microplaca. A quantidade de cristal violeta presente na fase líquida foi avaliada medindo-se a absorbância a 620 nm em leitor de microplaca. Para determinação da capacidade de formação de biofilme, foi utilizada a seguinte classificação: não formadora de biofilme (Doa ≤ Docn), fracamente formadora de biofilme (Docn < Doa ≤ 2 x Docn), moderadamente formadora de biofilme (2 x Docn < Doa ≤ 4 x Docn) e fortemente formadora de biofilme (4 x Docn < Doa). A capacidade de formação de biofilme de cada cepa de Bacillus cereus em ordem crescente foi CCT 7453 < ATCC11778 < ATCC14579 < CCT 2897, sendo classificadas em fracamente, fracamente, moderadamente e fortemente formadora de biofilmes, respectivamente. Observou-se que todas as espécies avaliadas apresentaram capacidade de adesão, porém ocorreu variabilidade na capacidade de adesão dentro da mesma espécie.