Resumo

Introdução: Clostridium difficile é a principal etiologia infecciosa de diarreia associada ao uso de antimicrobianos. O quadro pode variar desde diarreia sem maior gravidade até colite pseudomembranosa com perfuração do cólon. A maioria absoluta dos isolados detectados em pacientes sintomáticos produz a enterotoxina A e a citotoxina B, codificadas, respectivamente, pelos genes tcdA e tcdB. Além desses genes, no mesmo lócus há o gene tcdC, que codifica para um regulador negativo da expressão de tcdA e tcdB. A maioria absoluta das cepas hipervirulentas apresenta deleção parcial de tcdC e estão associadas a formas mais graves da colite por C. difficile e ocorrência de surtos, sendo o ribotipo predominante nesses casos o 027. Há uma escassez de informações sobre os ribotipos predominantes no Brasil e quanto à frequência de isolados com deleção parcial de tcdC. Material e métodos: Uma coleção de 73 isolados de C. difficile do Grupo Fleury coletados durante o ano de 2010 foram avaliados quanto à presença dos genes cdtA, cdtB, tcdA, tcdB e quanto à deleção parcial do gene tcdC, conforme descrito por Antikainen. A ribotipagem foi realizada conforme descrito por Bidet e colaboradores. Os produtos de PCR foram separados por eletroforese em gel de agarose Metaphor a 3% e visualizados sob luz UV após coloração com GelRed. A cepa ATCC BA-1803, que possui ribotipo 027, foi utilizada como referência. Os perfis obtidos foram analisados utilizando-se o programa Bionumerics. Resultados e discussão: Foram observadas elevadas frequências dos genes cdtA e cdtB (28,8%) e de deleção parcial de tcdC (30,2%). Em alguns isolados inicialmente não houve amplificação do gene tcdC. Utilizando-se oligonucleotídeos externos ao gene tcdC para PCR e sequenciamento, observou-se que a reação multiplex descrita por Antikainen não é capaz de detectar uma das variantes de tcdC presentes no Brasil. Foi observada a detecção de um mesmo ribotipo em diferentes hospitais e em pacientes externos. Apenas um dos isolados, detectado na cidade de Salvador, apresentou perfil compatível com o ribotipo 027. Conclusões: A amostragem analisada apresenta elevada frequência de deleção parcial de tcdC. Foi observada a presença de um mesmo ribotipo em diferentes hospitais da cidade de São Paulo, o que pode indicar disseminação ou predomínio desse ribotipo nessa cidade. Um isolado com perfil compatível com o ribotipo 027 foi detectado pela primeira vez no Brasil em um isolado da cidade de Salvador.