Resumo

Introdução: O fungo Aspergillus fumigatus é o segundo maior causador de infecções fúngicas invasivas em pacientes imunocomprometidos e a principal espécie causadora da aspergilose invasiva, doença de alta taxa de mortalidade que atinge principalmente os pulmões e que pode se disseminar pelo organismo. Para que a infecção seja bem sucedida, o fungo precisa se adaptar ao organismo do hospedeiro e um dos obstáculos encontrados é a mudança drástica na concentração de dióxido de carbono (CO₂), que, de 0,033% no ambiente, chega a até 6% no interior do hospedeiro. As anidrases carbônicas são enzimas envolvidas no processo de interconversão de dióxido de carbono em bicarbonato e já foram apontadas como importantes na virulência de patógenos como Candida albicans. Objetivo: Avaliação da expressão gênica global do fungo A. fumigatus exposto a diferentes concentrações de CO2. Materiais e métodos: O fungo A. fumigatus apresenta 4 homólogos da anidrase carbônica: A, B, C e D. Foram utilizadas linhagens mutantes com um ou dois homólogos deletados: ΔcafA, ΔcafB, ΔcafC, ΔcafD e ΔcafAΔcafB; também foi utilizada a linhagem selvagem (ΔakuB^ku80) que originou as mutantes. A análise da expressão gênica foi realizada por “microarray” e os resultados foram validados por qPCR. As linhagens foram submetidas a mudanças na concentração de CO₂: de 0,033% para 5% e de 5% para 0,033% e o RNA foi extraído em tempo padronizado previamente. Resultados e discussão: Não houve variação significativa na expressão gênica entre as linhagens mutantes e selvagem, demonstrando que, nos tempos e concentrações testados, os diferentes homólogos da enzima não interferem na expressão gênica. Porém, a variação da concentração CO₂ proporcionou a ativação e repressão de genes envolvidos em diversas funções tais como transporte e metabolismo e até genes com função desconhecida, como o cipC, que produz uma proteína hifa-específica, apontada como um potencial alvo para novos antifúngicos. Conclusão: Nas condições testadas, a anidrase carbônica não interferiu significativamente na expressão gênica frente ao CO₂, visto que as linhagens mutantes apresentaram expressão gênica semelhante à selvagem. Entretanto, observou-se que o fungo modula a expressão de genes para se adaptar às mudanças na concentração desse composto e os genes apontados nos experimentos podem ser alvos para estudos de novos antifúngicos.