Resumo

Introdução: Micro-organismos halofílicos e/ou halotolerantes estão adaptados à condições de altas salinidades e utilizam diversas estratégias para a manutenção do equilíbrio osmótico como a conservação de citoplasma com baixas concentrações de sais, mas com elevados níveis intracelulares de alguns osmólitos orgânicos. Entre as bactérias aeróbicas quimioheterotróficas, a ectoína é um dos principais osmólitos reguladores produzidos, conferindo proteção contra estresses osmóticos, além de permitir a ação de enzimas não adaptadas à salinidade, conferindo alta flexibilidade e adaptabilidade às células. O objetivo deste trabalho foi realizar um screening para detectar a produção de ectoína por linhagens de rizobactérias halotolerantes, isoladas de plantas halofílicas Atriplex sp., Blutaparon portulacoides e Spergularia sp - do semiárido brasileiro. Material e Métodos: Foi realizado isolamento seletivo direcionado, com intuito de obter bactérias halotolerantes. As amostras de solos rizosféricos foram submetidas à diluição seriada (10-1-10-6) e alíquotas (0,1mL) em TSA 10% a 2M de NaCl, 28°C por 8 dias. As culturas foram analisadas quanto a produção de exopolissacarideos (EPS) em 5 fontes de carbono (galactose, sacarose, glicose, maltose e frutose) a 28°C, 2 M de NaCl por 72h. A extração da ectoína da parede celular foi realizada com etanol e posteriormente submetida à análise por cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas em série (LC-MS/MS). Resultados: Trinta e duas linhagens de rizobactérias Atriplex sp., B. portulacoides e de Specularia sp. foram isoladas e cresceram a elevadas concentrações de sal (NaCl 2 M). Das linhagens avaliadas, 31% apresentaram elevada produção de EPS, estimulada principalmente pela presença de sacarose (2%). De acordo com as análises dos extratos da parede celular por LC-MS/MS, em 6 dessas linhagens foram detectadas a presença ectoína, quando comparadas com o padrão puro da substância (m/z 143 g mol-1, tempo de retenção de 6 min). A análise do perfil de ácidos graxos e o sequenciamento do gene 16S mostram que os isolados pertencem aos grupos das Halomonas aquamarina, Brevundimonas vesiculares, Enterococcus durans, Paenibacillus polymyxa, Klebisiella pneumoniae. Conclusões: Rizobactérias associadas a plantas halofílicas do semiárido brasileiro, são promissoras produtoras de osmoreguladores como ectoína, confirmando a necessidade de investigação da diversidade intocada do bioma caatinga, uma reserva da biosfera.