Resumo

Em bactérias, o mecanismo mais comumente observado para solucionar o paradoxo que surge entre a necessidade e toxicidade dos metais no metabolismo é a manutenção de genes envolvidos em captação, estocagem e efluxo destes metais. Na homeostase de zinco os mecanismos de captação, em geral, são regulados por um repressor transcricional, a proteína Zur, enquanto, genes codificantes para sistemas de efluxo são regulados por diversos ativadores transcricionais. Caulobacter crescentus, uma alfa-proteobactéria oligotrófica, possui em seu genoma um grande número de genes potencialmente envolvidos em captação e regulação da homeostase deste metal. Neste trabalho três linhagens mutantes foram obtidas para o gene codificante da proteína Zur e dois outros reguladores potencialmente envolvidos na homeostase de zinco, chamados aqui de zntR e czrA. A linhagem mutante zur apresenta um sutil retardo de crescimento em meio PYE. As linhagens mutantes czrA e zntR apresentam taxas de crescimento maiores que a da linhagens selvagem em meio M2 na carência de zinco. Dados preliminares indicam que nenhuma das linhagens apresenta sensibilidade aumentada a peróxido de hidrogênio nem a pirogalol, um gerador de radical superóxido, independente da fase de crescimento. Um trabalho anterior de nosso grupo identificou três genes potencialmente regulados pelo regulador Fur em reposta à disponibilidade de ferro por meio da predição de sítios de ligação de Fur sendo que, entretanto, não foram confirmados por ensaio de atividade de beta-galactosidase, sugerindo que fossem regulados por Zur ao invés de Fur, em resposta a disponibilidade de zinco. De acordo com ensaios de atividade de beta-galactosidase, dois destes genes respondem à carência de zinco e se mostraram regulados negativamente por Zur. O alinhamento das regiões a montante do início de tradução dos genes codificantes para proteínas receptoras TonB-dependentes, por meio do banco de dados MEME Suite, apresentou uma sequencia conservada como provável sítio de ligação de Zur, a qual é bastante semelhante com a Zur-box de outras proteobactérias. Esta sequencia foi utilizada para análises in silico em busca de genes que, resultou em cerca de 50 genes possivelmente regulados por Zur.